Broj leukocita u krvi

Princip. Brojanje leukocita tijekom mikroskopije na određenom broju kvadrata brojačke komore i izračunavanje njihovog broja u 1 litri krvi, uzimajući u obzir razrjeđivanje krvi i volumen komore za brojanje.

Reagens: 3-5% otopina octene kiseline, obojena za bojenje jezgre leukocita s nekoliko kapi otopine metilenskog plavog. Otopina ima plavu boju, može se pohraniti dugo vremena.

Tijek određivanja. U suhu epruvetu uliti 0,4 ml otopine octene kiseline. Od prsta se prikupi 0,02 ml krvi (možete koristiti vensku krv stabiliziranu antikoagulansom). Obrišite vrh pipete, zatim ispuhajte krv iz nje na dno epruvete, promiješajte, ponovno birajte i otpuhajte mješavinu krvi i reagensa (pipetiranje). Označite epruvetu i ostavite je do prebrojavanja. Store mješavinu krvi s otopinom octene kiseline se preporučuje ne više od 2-4 sata.

Krva razrijeđena u epruveti s octenom kiselinom, dobro promiješajte i napunite komorom za brojanje. Napunjena komora ostavljena je u vodoravnom položaju 1 min da bi se taložile bijele krvne stanice. Bez promjene vodoravnog položaja fotoaparata, postavljaju ga na stol mikroskopa i pri malom uvećanju (okular 10 ×, objektiv 8 ×) prebrojavaju bijele krvne stanice u 100 velikih kvadrata, što odgovara 1600 malih.

Za veću točnost, leukociti se broje preko mreže na velikim kvadratima, ne dijele se na male kvadrate i pruge, počevši od gornjeg lijevog kuta rešetke. Za bolji kontrast zamračite vidno polje, spustite kondenzator i zatvorite otvor. Stanice koje se nalaze unutar kvadrata i leže na bilo koje dvije linije broje se kako ne bi dvaput brojale istu ćeliju.

Izračun broja leukocita provodi se prema formuli:

gdje je X broj leukocita u 1 μl krvi; i - broj leukocita u 100 velikih kvadrata; 20 - razrjeđenje krvi; 100 je broj velikih kvadrata; 250 je faktor konverzije po 1 μl, budući da je volumen jednog velikog kvadrata 1/250 μl (strana kvadrata je 1/5 mm, visina 1/10 mm).

U praksi, da bi se izračunao broj leukocita u 1 μl krvi, njihov broj u 100 velikih kvadrata pomnoži se s 50, au 1 litru - dobivena vrijednost množi se s 106.

Napomena. Kod brojanja leukocita, pogreška je neizbježna u 6-8% slučajeva.

  1. Kod velikog broja normocita u perifernoj krvi oni se broje u broju leukocita (i leukocita i normocita - stanica jezgre). Kako bi se pravilno utvrdio broj leukocita, od ukupnog broja nukleiranih krvnih stanica treba oduzeti broj normocita.
  2. Preostale pogreške su slične onima koje se pojavljuju pri izračunavanju broja crvenih krvnih zrnaca u komori za brojanje.

Broj leukocita

Način brojanja u fotoaparatu. Uzimanje i razrjeđivanje krvi proizvedeno metodom cijevi. 0,4 ml tekućine za razrjeđivanje i 0,02 ml kapilarne krvi unose se u epruvetu (po mogućnosti Vidalevskaya). Dobiveno razrjeđenje praktički se smatra 1:20, a kao razrjeđivač se obično koristi 3-5% -tna otopina octene kiseline obojana metilenskim plavim (lizes octene kiseline, eritrociti, metilensko plavo, jezgre leukocita). Prije punjenja komore Goryaeva cijev s razrijeđenom krvi temeljito se protrese. Komora je napunjena na isti način kao i za brojanje crvenih krvnih stanica.

Leukociti su mnogo manji od eritrocita (1-2 na veliki kvadrat), stoga se za točnost računaju u 100 velikih kvadrata (negradirani). Izračun: 100 velikih kvadrata (1600 malih) se računa kao leukocit.
Podsjetivši da je volumen malog kvadrata 1/4000 mm3, a krv razrijeđena 20 puta, izračunat je broj leukocita u 1 μl krvi: 4000 20 i podijeljen sa 1600 = a x 1/2. Praktično, za dobivanje stvarnog sadržaja leukocita u 1 μl krvi, dovoljno je podijeliti na pola broj dobiven u izračunu i dodati 2 nule. Prosječna pogreška metode je ± 7%.

Točnije (pogreška od 2-3%) i savršena je broj leukocita pomoću elektroničkih uređaja. Brojanje leukocita u brojačima čestica provodi se prema istom principu kao i eritrociti. Prijekrv se razrijedi i pomiješa s bilo kojim reagensom koji lizira crvene krvne stanice. U autoanalizatoru "Technicon", kao takva se koristi otopina octene kiseline, u uređajima "Culter" i "Celloskop" - saponin ili sapoglobin, koji se dodaju razrijeđeni (1: 500, 1: 700) u izotoničnoj otopini natrijevog klorida (6 kapi po 20 ml). razrjeđenje).

Brojanje leukocita u krvi provodi se u obojenim razmazima periferne krvi.
Bolje je brojati na najtanjem mjestu blizu kraja razmaza, najmanje 200 stanica (osim izražene leukopenije), a zatim izračunati postotni omjer određenih vrsta bijelih krvnih stanica. Brojanje se preporuča u istom redoslijedu: polovica stanica se broji na vrhu, pola na dnu poteza, bez odlaska na sam rub i sredinu, cik-cak (3-4 vidna polja uzduž udarca, 3-4 polja pod pravim kutom prema sredini udarca, zatim 3-4 polja u stranu paralelno s rubom, ponovno pod pravim kutom prema gore i tako dalje na jednu stranu).

Priprema razmaza. Pažljivo oprano i odmašćeno staklo (njegov rub) dodiruje kap krvi na mjestu ubrizgavanja. Razmažite brusnim staklom, stavljajući ga pod kutom od 45 ° na klizač ispred kapljice. Nakon što su doveli čašu do te kapi, oni čekaju da se krv širi duž njezinog ruba, a zatim jednostavnim pokretom izvrše brusno staklo naprijed, ne odvajajući ga od objekta prije nego što isuši cijelu kap.

Ispravno napravljen razmaz ima žućkastu boju (tanku), ne doseže rubove stakla i završava tragom (brkovima).

Bojenje suhih razmaza nakon prethodne fiksacije. Najbolja fiksacija se postiže u apsolutnom metilenskom alkoholu (3-5 minuta) ili u mješavini Nikiforova od jednakih dijelova apsolutnog etanola i etera (30 minuta).

Glavne hematološke boje uključuju metilensko plavo i njegov derivat - azurno I (metilen azurno) i azurno II (mješavina jednakih dijelova azurnog I i metilensko plavog), do kiselog - vodotopivi žuti eozin.

● Slikarstvo Romanovskog-Giemsa. Romanovsky-Giemsa boja (tvornički proizvedena) ima sljedeći sastav: Azur II - 3 g, vodotopivi žuti eozin - 0,8 g, metilni alkohol - 250 ml i glicerin - 250 ml. Radna otopina boje priprema se po stopi od 1,5-2 kapi gotove boje po 1 ml destilirane vode. Boja se izlije na razmaz s mogućim višim slojem; vrijeme bojanja - 30-35 minuta Nakon tog razdoblja obrisci su isprani vodom i osušeni na zraku. U ovoj metodi moguće je dobro razlikovati jezgru, ali je neutrofilna zrnatost citoplazme mnogo gora, pa se naširoko koristi za bojenje razmaza periferne krvi.

● Kombinirano bojanje May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa prema Pappenheimu. Gotova boja, May-Grunwaldov fiksativ, otopina eozinmetilen plavog u metilenskom alkoholu, pipetira se na fiksni razmaz 3 minute. Nakon 3 minute, doda se jednaka količina destilirane vode u boju koja pokriva otopinu i obojenje se nastavi još 1 minutu. Nakon toga, boja se ispere i razmaz se suši na zraku. Zatim se osušeni razmaz preboji svježe pripremljenom vodenom otopinom Romanovskog boje 8-15 minuta. Ova metoda se smatra najboljom, posebno za mrlje punktova koštane srži.

Povećanje broja leukocita u perifernoj krvi iznad normalne razine naziva se leukocitoza, a smanjenje se naziva leukopenija. Leukocitoza (leukopenija) rijetko je obilježena proporcionalnim povećanjem (smanjenjem) broja leukocita svih vrsta, na primjer, leukocitoze s zgušnjavanjem krvi. U većini slučajeva dolazi do povećanja broja (smanjenja) bilo kojeg tipa stanica. Povećanje ili smanjenje broja pojedinačnih tipova leukocita u krvi može biti relativno ili apsolutno, ovisno o ukupnom broju leukocita - normalnom, povišenom ili smanjenom. Promjena broja, omjera pojedinih oblika i morfologije leukocita ovisi o vrsti i virulentnosti patogena, prirodi, tijeku i opsegu patološkog procesa, individualnoj reakciji organizma.

Metoda brojanja leukocita u komori Goryaev

Bijele krvne stanice - bijele krvne stanice - igraju važnu ulogu u antimikrobnoj zaštiti tijela. Granulociti fagocitiraju mikrobe i uništavaju ih pomoću enzima zatvorenih u granulama, limfociti proizvode antitijela i osiguravaju imunološki odgovor na tijelo.

Metoda određivanja metode epruvete: sipajte u epruvetu 0,4 ml otopine Türka (Türkova tekućina sadrži octenu kiselinu da uništi crvene krvne stanice i metilensko plavo za bojenje jezgre leukocita). Pomoću kapilarne pipete izvucite 0,02 ml krvi iz svježe kapi, nježno je protresite u epruvetu s reagensom i isperite pipetu. Dobro izmiješajte. Istovremeno, razrjeđivanje krvi je 20 puta. Na kraju okruglog staklenog štapića skupljena je kap razrijeđene krvi i nanesena na rub polirane staklene komore.

Brojanje se provodi u 100 velikih neprekinutih kvadrata, sastavljenih od četiri. Koristio je mali porast.

Izvođenje formule brojanja broj 1.

1. 100 kvadrata sadrži 1600 malih kvadrata (16 x 100)

2. Volumen krvi iznad malog kvadrata 1/4000 mm3

3. Razrjeđivanje krvi 20 puta

Broj leukocita u 1 μl krvi = na -4000-20. = Ax 50

Na primjer: 130 leukocita prebrojano je na 100 velikih kvadrata Goryaevove mreže. U 1 μl krvi broj leukocita bit će 130 x 50 = 6500 ili 6,5-10 3.

Da bi se odredio sadržaj leukocita u 1 litri krvi, broj leukocita, izražen u tisućama, mora se pomnožiti s 10 9.

U našem primjeru, broj leukocita u 1 litri krvi je 6.5-10 9.

194.48.155.245 © studopedia.ru nije autor objavljenih materijala. No, pruža mogućnost besplatnog korištenja. Postoji li kršenje autorskih prava? Pišite nam | Kontaktirajte nas.

Onemogući oglasni blok!
i osvježite stranicu (F5)
vrlo je potrebno

Broj leukocita u krvi

Leukocitoza može biti apsolutna (istinita) i relativna (redistributivna).

Apsolutna leukocitoza uočena je kod akutnih upalnih procesa, nekroze tkiva, akutnih bakterijskih infekcija (s iznimkom tifusne groznice, bruceloze, tularemije, itd.), Alergijskih stanja, malignih tumora (s uništavanjem tkiva), zatvorenih ozljeda glave i krvarenja u mozgu, dijabetesa. uremička koma, šok, akutni gubitak krvi, kao primarna reakcija - zračenjem. Kod leukemije dolazi do značajnog povećanja broja leukocita.

Relativna (redistributivna) posljedica je primitka leukocita u protoku krvi iz organa koji služe za njezin depo. Pojavljuje se nakon jela (leukocitoza hrane), toplih i hladnih kupki, jakih emocija (vegetovaskularna leukocitoza), intenzivnog mišićnog rada (miogene leukocitoze), itd.

Leukopenija. Leukopenija se smatra pokazateljem inhibicije funkcionalne sposobnosti koštane srži kao posljedice izloženosti toksičnim tvarima (arsen, benzen, itd.), Nekim lijekovima (sulfanilamidi, kloramfenikol, butadion, imuno, ciklofosfamid itd.), Virusi (gripa, virusni hepatitis)., ospice, itd.), mikrobe (tifus, bruceloza, itd.), ionizirajuće zračenje, rendgenske zrake i hipersplenizam (povećana funkcija slezene).

Leukocitoza i leukopenija rijetko su karakterizirane proporcionalnim povećanjem (smanjenjem) ukupnog broja leukocita svih vrsta (na primjer, leukocitoza s zgušnjavanjem krvi); u većini slučajeva dolazi do povećanja (smanjenja) broja bilo koje vrste stanica, stoga se koriste pojmovi "neutrofilija", "neutropenija", "limfocitoza", "limfopenija", "eozinofilija", "eozinopija", "monocitoza", "monocitopenija"., "Bazofilija."

U kliničkoj procjeni promjena broja leukocita veliku važnost pridaje postotnom omjeru pojedinih oblika leukocita, tj. Leukocitne formule.

Leukocitna krvna slika zdrave osobe:

Relativni iznos Apsolutni iznos

Bazofili ……………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l

Eozinofili …………………….0.5-5% 0.02-0.30 x 10 9 / l

Neutrofili: - mielociti... 0% odsutni

- izboden... 1-6% 0,040-0,300 x 109 / l

- segmentirano….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l

Limfociti …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / L

Monociti ………………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L

Brojanje leukocita provodi se u obojenim razmazima periferne krvi. Za ispravno tumačenje rezultata proučavanja formule leukocita preporučuje se računati u apsolutnim količinama, ali ne u relativnim. Najčešće metode slikanja razmaza Romanovskog-Giemsa, Pappenheim. Pod imerzijom se broji najmanje 200 stanica, a zatim se dobije postotni omjer određenih tipova leukocita. Analiza leukograma uzimajući u obzir druge krvne parametre i kliničku sliku vrijedna je metoda ispitivanja, pomaže u dijagnozi i određivanju prognoze bolesti.

Glavni uzroci neutrofilije.

Akutne bakterijske infekcije - lokalizirane i generalizirane.

Upala ili nekroza tkiva.

Ljekoviti učinci (kortikosteroidi).

Glavni uzroci neutropenije.

Infekcije - bakterijske (tifus, bruceloza, tularemija, paratifus) i virusne (infektivni hepatitis, ospice, gripa, rubeola i dr.).

Mijelotoksični učinci i supresija granulocitopoeze (ionizirajuće zračenje; kemijska sredstva - benzen, anilin, DDT; ljekoviti učinci - citostatici i imunosupresivi; vitamin-B12-nedostatak folne kiseline, akutna aleukemijska leukemija, aplastična anemija).

Izloženost antitijelima (imuni oblici) - preosjetljivost na lijekove, autoimune bolesti (SLE, reumatoidni artritis, kronična limfna leukemija), izoimune manifestacije (hemolitička bolest novorođenčeta).

Redistribucija i taloženje u organima - stanja šoka, bolesti sa splenomegalijom i hipersplenizmom.

Nasljedni oblici (obiteljska benigna kronična neutropenija).

Glavni uzroci eozinofilije.

Parazitske invazije (trihinoze).

Kronične lezije kože - psorijaza, pemfigus, ekcem.

Tumori (eozinofilne varijante leukemije).

Ostale bolesti - fibroplastični endokarditis Lefflera, grimizna groznica.

U fazi oporavka infekcija i upalnih bolesti (povoljan prognostički znak).

Uzroci eozinopenije (aneozinofilija).

Povećana aktivnost adrenokortikosteroida u tijelu.

Glavni uzroci bazofilije:

Kronična mijeloidna leukemija i eritremija.

Glavni uzroci monocitoze.

Subakutne i kronične bakterijske infekcije.

Parazitske infekcije - lišmanijaza, malarija.

Hemoblastoza - monocitna leukemija, limfogranulomatoza, limfomi.

Ostala stanja su SLE, sarkoidoza, reumatoidni artritis, infektivna monocitoza; u razdoblju oporavka od infekcija, pri ostavljanju agranulocitoze, nakon splenektomije.

Smanjenje broja monocita je važno u procjeni omjera limfocita i monocita u plućnoj tuberkulozi.

Glavni uzroci limfocitoze.

Infekcije - akutni virusni (infektivna mononukleoza, ospice, rubeola, boginje), kronična bakterija (tuberkuloza, sifilis, bruceloza), protozoa (toksoplazmoza).

Hemoblastoza (limfocitna leukemija, limfom).

Ostale bolesti - hipertireoza, Addisonova bolest, vitamin B12-folna anemija, hipo-i aplastična anemija.

Limfocitopenija je uočena kod SLE, Hodgkinove bolesti, raširene tuberkuloze limfnih čvorova, u terminalnom stadiju zatajenja bubrega, akutne radijacijske bolesti, stanja imunodeficijencije, uzimanja glukokortikoida.

Povećanje ili smanjenje broja određenih vrsta leukocita u krvi može biti relativno ili apsolutno. Ako se mijenja samo postotak određene vrste bijelih krvnih stanica, tada dolazi do relativne neutrofilije, relativne eozinopenije itd. Povećanje ili smanjenje apsolutnog sadržaja bilo koje vrste leukocita, odnosno broj tih stanica po jedinici volumena krvi, naziva se apsolutna neutrofilija, apsolutna eozinopenija itd.

Pomicanje formule ulijevo (povećanje broja mladih oblika neutrofila) znak je upale ili nekrotičnog procesa u tijelu.

Pomak leukocitne formule u desno je karakteristika radijacijske bolesti i vitamina-B12-nedostatak folne kiseline.

Izostanak ili značajno smanjenje broja svih vrsta granularnih leukocita - granulocita (neutrofila, eozinofila, bazofila) označeno je izrazom agranulocitoza. Ovisno o mehanizmu pojave, razlikuju se mijelotoksični (učinci ionizirajućeg zračenja, citostatski unos) i imunološki (hapten i autoimune agranulocitoza).

Leukociti (leukociti)

Leukociti. Kvantitativno određivanje leukocita. Brojanje leukocita pomoću kamere Goryaeva. Kvantitativni sadržaj leukocita. Leukocitoza.

Bijele krvne stanice

Broj leukocita u krvi ovisi kako o brzini njihovog stvaranja, tako io njihovoj mobilizaciji iz koštane srži, kao io njihovoj uporabi i migraciji u tkiva (na lezije), hvatanje plućima i slezenom. Ti procesi, pak, pod utjecajem su brojnih fizioloških čimbenika, pa je stoga broj leukocita u krvi zdrave osobe podložan fluktuacijama: ona raste do kraja dana, tijekom fizičkog napora, emocionalnog stresa, unosa proteinske hrane i naglih promjena temperature okoline.

Kvantitativno određivanje leukocita

Leukociti se broje pomoću kamere Goryaev i korištenjem automatskih brojača.

Brojanje leukocita pomoću kamere Goryaeva

S metodom in vitro uzimanja krvi za brojanje leukocita:

  • U epruvetu se ulije 0,4 ml otopine 3-5% -tne octene kiseline obojene metilen-plavom. Pomoću kapilarne pipete izvucite 20 μl krvi iz svježe kapi (razrjeđenje 20 puta), pažljivo je propušite u epruvetu s reagensom i isperite pipetu. Dobro izmiješati;
  • čisto i suho pokrovno staklo se protrlja na komoru tako da se na mjestu kontakta formiraju duginih prstena;
  • razrijeđena krv u epruveti, dobro promiješajte. Kraj okrugle staklene šipke uzima kap krvi i dovodi je do ruba poliranog stakla komore;
  • nakon punjenja komore ostavlja se 1 minutu mirovanja za taloženje leukocita;
  • Smatra se da su leukociti pri malom povećanju (objektiv × 8 ili × 9, okular × 10 ili × 15) s tamnim vidnim poljem (s spuštenim kondenzatorom ili suženom dijafragmom);
  • za zadovoljavajuće rezultate, leukociti se broje u 100 velikih kvadrata.

Znajući volumen velikog kvadrata i stupanj razrjeđenja krvi, pronađite broj leukocita u 1 μl i 1 l krvi. Strana velikog kvadrata je 1/5 mm, površina je 1/25 mm2, a volumen prostora iznad tog kvadrata je 1/250 mm3.

Formula za brojanje bijelih krvnih stanica:

gdje je B broj leukocita u 100 velikih kvadrata;
P - stupanj razrjeđenja (20).

Broj leukocita

Norma: 4,0–9,0 × 10 9 / L

Nazvan je porast broja leukocita iznad 9,0 × 10 9 / l
leukocitoza, smanjenje njihovog broja ispod 4,0 × 10 9 / l - leukopenija. Međutim, čak 3,5 × 109 u 1 l leukocita za određeni broj pojedinaca može biti norma. Prema literaturi, takvi ljudi imaju povećanu imunološku otpornost i manje je vjerojatno da će se razboljeti, što se čini kao posljedica potrebe za imunološkim odgovorom da ima rezervu leukocita u tkivima, gdje je 50 do 60 puta više nego u krvotoku. Očigledno, kod zdravih osoba s niskim brojem bijelih krvnih stanica u perifernoj krvi, njihove rezerve u tkivima se odgovarajuće povećavaju. Ovaj fenomen objašnjava se nasljednim i obiteljskim karakterom ili povećanjem utjecaja parasimpatičkog živčanog sustava.

Leukopenija može biti funkcionalna i organska.
Funkcionalna leukopenija povezana je s poremećenim reguliranjem stvaranja krvi i primjećuje se:

  • s nekim bakterijskim i virusnim infekcijama (tifus, gripa, velike boginje, rubeola, Botkinova bolest, ospice);
  • pod djelovanjem lijekova (sulfonamidi, analgetici, antikonvulzivi, antitireoidni, citostatički i drugi lijekovi);
  • tijekom mišićnog rada, uvođenja stranih bjelančevina, živčanih i temperaturnih učinaka, gladovanja, hipotoničnih stanja;
  • lažna leukocitopenija može biti povezana s agregacijom leukocita tijekom dugotrajnog skladištenja krvi na sobnoj temperaturi (više od 4 sata).

Organska leukopenija nastala kao rezultat aplazije koštane srži i njezine zamjene masnim tkivom nastaje kada:

  • aplastična anemija;
  • agranulocitoza;
  • leukopenijska leukemija;
  • neki oblici Hodgkinove bolesti;
  • ionizirajuće zračenje;
  • hipersplenizam (primarni i sekundarni);
  • bolesti kolagena.

leukocitoza

Leukocitoza je reakcija hematopoetskog sustava na učinke
egzogeni i endogeni čimbenici. Postoje fiziološke i patološke leukocitoze.

Fiziološka leukocitoza je:

  • probavni - nakon jela, osobito bogato proteinima; broj leukocita ne prelazi 10,0 - 12,0 × 10 9 / l, a nakon 3-4 sata se vraća u normalu;
  • s emocionalnim stresom (adrenalin), teškim fizičkim naporom, hlađenjem, prekomjernim izlaganjem suncu (opeklinama od sunca), davanjem niza hormona (kateholamina, glukokortikosteroida, itd.), u drugoj polovici trudnoće, tijekom menstruacije i zbog nejednake raspodjele leukocita u krvi mainstream.

Patološka leukocitoza je podijeljena na apsolutnu i relativnu.

Apsolutna leukocitoza - povećanje broja leukocita u krvi do nekoliko stotina tisuća (100,0–600,0 × 10 9 / l i više).

  • Najčešće se opaža kod leukemije: u kroničnoj leukemiji - u 98-100% slučajeva, s akutnom leukemijom - u 50-60%. Promjena u omjeru leukocitnih stanica u koštanoj srži i punktatu krvi služi kao osnova za dijagnozu leukemije.

Uočena je relativna leukocitoza:

  • akutni upalni i infektivni procesi, s iznimkom tifusa, gripe, velikih boginja, rubeole, Botkinove bolesti, ospica. Najveća leukocitoza (do 70,0–80,0 × 10 9 / l) opažena je kod sepse;
  • pod utjecajem otrovnih tvari (otrovi insekata, endotoksini), ionizirajućeg zračenja (odmah nakon zračenja);
  • kao rezultat djelovanja kortikosteroida, adrenalina, histamina, acetilkolina i preparata digitalisa;
  • s raspadom tkiva (nekroza), infarktom miokarda, trombozom perifernih arterija s razvojem gangrene, opekotina, eksudativnog pleuritisa, perikarditisa, uremije, jetrene kome;
  • značajan gubitak krvi kod ozljeda, unutarnjih, ginekoloških i drugih krvarenja.

Povećanje broja leukocita u zaraznim bolestima u većini slučajeva popraćeno je pomakom leukocitne formule u lijevo

Broj leukocita i broj leukocita.

Za brojanje leukocita, krv se razrjeđuje u mješalicama ili u epruvetama. U tu svrhu upotrijebite 3-5% -tnu otopinu octene kiseline (za uništenje crvenih krvnih zrnaca), obojenu bilo kojom anilinskom bojom (za bojenje jezgre leukocita). Mreža za brojanje je ispunjena na isti način kao i za brojanje crvenih krvnih stanica. Leukociti se broje u 100 velikih kvadrata. U Goryaevovoj mreži, pogodno je brojati ih u neprekinutim kvadratima (na njima ih ima 100). S obzirom na razrjeđenje krvi i volumen tekućine iznad kvadrata, izračunajte konstantni množitelj. Kada se uzgaja 20 puta to je 50.

Prilikom rada s epruvetama, prethodno se u njih ulije 0,38 ml tekućine i u nju se ispusti 0,02 ml krvi. Za izračun automatskog brojanja u epruvetama, crvene krvne stanice hemoliziraju saponinom. Normalan broj bijelih krvnih stanica iznosi 4.3 • 10 9 -11.3 • 10 9 / l, ili 4300-11 300 u 1 μl krvi.

Brojanje leukocita broji se u obojenim razmazima.

Dobar razmaz ispunjava sljedeće zahtjeve: tanak je, a oblikovani elementi leže u njemu u jednom sloju; u ovom slučaju razmaz je žut i proziran. Dobar razmaz je ravnomjeran, a stanice se ne oštećuju razmazivanjem. Da bi krv ravnomjerno ležala na staklu, odmašćuje se spaljivanjem plinskog plamenika preko plamena ili se čuva u mješavini alkohola i etera. S krajem čaše dodiruju svježe ispuštenu kapljicu krvi i bez odlaganja ga šire na staklu. Prije bojenja, razmaz se fiksira uranjanjem u metanol tijekom 3 minute, u etanolu ili njegovoj smjesi s eterom tijekom 30 minuta. Postoje i brojni drugi popravljači. Brisač osušen nakon fiksiranja napunjen je bojom.

Za razlikovanje krvnih stanica (definicije formule leukocita) pribjegavajte diferencijalnom bojanju. Najčešće korištena bojanja Romanovskog-Giemsa. Ova boja je mješavina slabo kiselih (eozina) i slabo alkalnih (azurno-bijelih) boja. Stanice i njihovi dijelovi, ovisno o reakciji medija, u njima uočavaju jednu ili drugu komponentu boje: kisele (bazofilne) tvari su obojene azurno plavom, alkalnom (oksifilnom) obojenom eozinom crvenom; Neutralno percipiraju obje boje i postaju ljubičaste.

Leukocitna formula odnosi se na postotak pojedinačnih oblika leukocita u krvi.

Za dovoljno točan izračun potrebno je pregledati najmanje 200 bijelih krvnih stanica.

Brojanje se vrši pomoću imerzijskog sustava. S obzirom na to da su stanice nejednako smještene u razmaku (veće one idu na rubove), važno je pridržavati se takvog reda kretanja na razmazi, u kojoj bi se njezini rubovi i srednji dio jednako gledali. Koristi se jedan od dva načina kretanja: jedan od njih pomiče potez od gornjeg ruba do donjeg, pomiče ga 2 do 3 vidna polja duž ruba, zatim ide u suprotnom smjeru od gornjeg ruba, itd. U drugoj metodi oni se kreću od ruba do 5. —6 polja do sredine udarca, zatim isti iznos bočno, zatim natrag do ruba, pomaknite se u stranu nekoliko strana i ponovite pokret opet dok se ne izbroji 50 stanica. Pogledajte 4 od tih mjesta na 4 ugla razmaza. Broje 200 stanica, broj se dijeli na pola i određuje broj svake vrste bijelih krvnih stanica.

Leukociti su elementi krvi, koji brzo reagiraju na različite vanjske utjecaje i promjene unutar tijela. Određivanje ukupnog broja leukocita može biti od velike dijagnostičke vrijednosti, jer otkriva stanje krvotvornih organa ili njihov odgovor na štetne učinke. Povećanje broja leukocita - leukocitoza - posljedica je aktivacije leukopoeze, smanjenje njihovog broja - leukopenija - može ovisiti o inhibiciji krvotvornih organa, njihovom smanjenju i povećanom razgradnji leukocita pod djelovanjem antileukocitnih antitijela 1. Neutrofili. Najviše varijabilna skupina leukocita su neutrofili, čiji se broj povećava s mnogim infekcijama, intoksikacijama i razgradnjom tkiva.

Karakteristika aktivnog neutronovi nije samo povećanje ukupnog broja neutrofila u krvi, nego i pojava nezrelih oblika u njemu: povećava se broj ubodnih stanica, pojavljuju se mladi neutrofili, ponekad čak i mielociti. Ovo "pomlađivanje" neutrofilnog sastava naziva se pomicanje leukocita u lijevo. Zaštitnu ulogu neutrofila određuje njihova fagocitna funkcija, baktericidno djelovanje i oslobađanje proteolitičkih enzima koji potiču resorpciju nekrotičnog tkiva i zacjeljivanje rana.

Najčešće dolazi do regenerativnog pomaka u prisutnosti bilo kojeg upalnog procesa ili žarišta nekroze. Vrlo oštar lijevi pomak prema promijelocitima pa čak i mieloblastima sa značajnom leukocitozom naziva se leukemoidna reakcija. Smanjenje broja neutrofila - apsolutne neutropenije - događa se kada koštana srž inhibira izlaganje toksinima nekih mikroorganizama (uzročnika tifusne groznice, bruceloze itd.) I virusa, ionizirajućeg zračenja, brojnih lijekova.

2. Limfociti. Limfocitoza se opaža u razdoblju oporavka od akutnih zaraznih bolesti, s infektivnom mononukleozom, infektivnom limfocitozom, limfocitnom leukemijom, rubeolom, brucelozom, tirotoksikozom.

Apsolutna limfopenija javlja se kod bolesti zračenja, sistemskih lezija limfnog sustava: limfoma, limfosarkoma.

3. Eozinofili. Nalaze se u krvi u relativno malim količinama (uglavnom se nalaze u tkivima), no njihov se broj ponekad značajno povećava kod alergijskih procesa (serumska bolest, bronhijalna astma), helmintske invazije i pruritične dermatoze.

Smanjenje broja eozinofila - eozinopenije - do njihovog potpunog nestanka zabilježeno je kod sepse, teških oblika tuberkuloze, tifusa i teške intoksikacije.

4. Bazofili. Nositelji su važnih posrednika u metabolizmu tkiva ("ekvivalenti" stanica stanica masnog tkiva). Kada je organizam senzibiliziran, njihov se broj povećava, a kada se alergen ponovno uvede, naglo se smanjuje kao rezultat njihovog sloma.

5. Monociti. Povećanje broja monocita - monocitoza - pokazatelj je razvoja imunoloških procesa. Monociti se prepoznaju kao analozi tkivnih makrofaga. Monocit se nalazi u brojnim kroničnim bolestima (kroniosepsija, tuberkuloza, sifilis). Monocitopenija je ponekad opažena kod teških septičkih, hipertoksičnih oblika tifusa.

Agranulocytes. Karakteristična značajka agranulocita su nesegmentna jezgra i bazofilna (plava) citoplazma.

Limfociti su najmanja veličina leukocita. Jezgra je okrugla, ovalna ili u obliku graha; zauzima najveći dio stanice, intenzivno obojen. Citoplazma većine limfocita s uskim rubom okružuje jezgru, obojena je svijetlo plavom bojom i pročišćena je do jezgre.

Monocit je najveći od krvnih stanica. Velika jezgra nepravilnog oblika i relativno svijetle boje. Citoplazma je sivkasto-plava, zadimljena boja, nije razjašnjena do jezgre

Osim ovih stanica, rijetko je u normalnoj krvi, a plazma stanice se često mogu pojaviti kod bolesti. Odlikuju se ekscentrično postavljenom gustom jezgrom, često strukturom nalik kotaču. Broj ovih stanica raste s određenim zaraznim bolestima, sepsom rane i multiplim mijelomom.

Prilikom izračunavanja formule leukocita, pozornost se posvećuje ne samo kvantitativnim pomacima u njoj, već i kvalitativnim promjenama u elementima forme. Ranije su zabilježene degenerativne promjene u leukocitima. S teškom intoksikacijom, granulacija neutrofila postaje obilna, velika, intenzivno obojena i naziva se toksična (ili toksogena). Ponekad se krvni razmazi nalaze u razmazima krvi, naslikanim kao nuklearna supstanca leukocita. To su tzv. Botkin - Humprecht sjene - ostaci nuklearnog kromatina, koji ukazuju na povećanu krhkost leukocita, što dovodi do njihovog sloma - leukocitoliza

99. Metode određivanja krvne grupe, pojam Rh faktora.

1. Određivanje krvne grupe standardnim serumima:

Potrebna je sljedeća oprema:

dva seta standardnih seruma hemaglutinirajućih I (0), II (A), III (B) skupina od dvije različite serije i jedna bočica seruma IV (AB)

• bočicu s izotoničnom otopinom natrijevog klorida s pipetom

o čistu suhu ploču očistiti

o staklena stakalca

o sterilne igle za koplje za probijanje mesa prsta

o sterilne loptice od gaze,

Standardni serumi za određivanje krvne grupe prema ABO sustavu proizvedeni su sa specifičnom bojom.: I (0) - bezbojan, II (A) - plava, III (B) - crvena, IV (AB) - žuta. Serum pohranjen na 4-10 ° C. Serum treba biti lagan i proziran. Prisutnost pahuljica, sedimenta, zamućenosti su znakovi nepodobnosti seruma. Prvi znakovi aglutinacije trebali bi se pojaviti najkasnije 30 sekundi.

Ploča je podijeljena u 4 kvadrata obojenom olovkom, au smjeru kazaljke na satu označeni su kvadratići I (0), II (A), III (B). Veliku kapljicu seruma dvije skupine I (0), II (A) i W (B) stavlja se u odgovarajući kvadrat ploče s pipetom. Pločica za prst je tretirana alkoholom, a igla je probušena. Prva kap krvi se ukloni lopticom od gaze, zatim se kapljice u različitim dijelovima klizača nanose sukcesivno na kapljice seruma i temeljito miješaju. Kap krvi trebala bi biti 5-10 puta manja od kapi seruma. Zatim tresući ploču temeljito pomiješati krv sa serumom. Preliminarni rezultati se procjenjuju nakon 3 minute, nakon čega se doda kap izotonične otopine natrijevog klorida, ponovno promiješa s mućkanjem ploče i nakon 5 minuta provodi se konačna procjena reakcije aglutinacije.

Pozitivnim izohemaglutinacijskim testom, pahuljice i zrna iz adheriranih crvenih krvnih stanica ne odstupaju pri dodavanju izotonične otopine natrijevog klorida i miješanju.

Kada je negativna reakcija kapi seruma na tanjuru transparentne, ravnomjerno ružičaste, ne sadrže pahuljice i žitarice.

Moguće su slijedeće 4 kombinacije aglutinacijskih reakcija sa standardnim serumima I (0), II (A), III (B) skupina.

v Sva 3 seruma u obje serije ne aglutiniraju. Krvni test -

I grupu.

v Reakcija izohemaglutinacije negativna s serumskim P (A) skupinama obiju serija i pozitivnim skupinama I (0) i III (B) seruma. Krvni test -

II (A).

v Reakcija izohemaglutinacije negativna je u serumu III (B) skupine u obje serije i pozitivna sa serumom I (0) i II (A) skupina. Krvni test -

III (B) skupinu.

v Serum I (0), II (A), III (B) skupine daju pozitivnu reakciju u obje serije. Krv pripada skupini IV (AB). Ali prije davanja takvog zaključka, potrebno je provesti izohemaglutinacijsku reakciju sa standardnim serumom IV (AB) skupine koristeći isti postupak. Negativan izohemaglutinacijski test omogućuje konačno dodjeljivanje ispitivane krvi IV (AB) skupini.

2. Pojam Rh faktora.

Drugi antigen (aglutinogen) pronađen je u eritrocitima, koji se naziva Rh faktor. Svi ljudi su podijeljeni na pojedince s Rh-pozitivnim (Rh +) i Rh-negativnim (Rh) krvima. Utvrđeno je da 85% ljudi u eritrocitima sadrži Rh faktor, tj. Njihova krv je Rh-pozitivna, a 15% ga ne sadrži, tj. Krv tih ljudi je Rh negativna. Na Rh faktor (Rh-antigen) u krvi obično nema anti-Rh-aglutinina (gotova antitijela). Takva se antitijela pojavljuju u krvnom serumu samo kao posljedica imunizacije osobe s Rh-negativnom krvi s Rh-pozitivnim crvenim krvnim stanicama. Do takve imunizacije dolazi uslijed ponovljenih transfuzija Rh-pozitivne krvi u Rh-negativnog primatelja ili tijekom trudnoće žene s Rh-negativnom Rh pozitivnom krvlju. Imunizirani na ovaj način, ljudi postaju senzibilizirani: kada se transfuzija s Rh pozitivnom krvlju, razvije ozbiljna komplikacija - šok transfuzije krvi.

Brojanje broja leukocita i trombocita

Čimbenici koji utječu na ispravnost istraživanja bijelih krvnih stanica

- dugo čuvanje krvi na sobnoj temperaturi

Norme broja bijelih krvnih stanica

Dob Broj leukocita

- 1 dan 11,6 - 22,0

- 1 tjedan 8.1.- 14.3

- 1 mjesec 7,6 - 12,4

- Odrasli 4.0 - 9.0

Metode za određivanje broja leukocita u krvi.

- Brojanje broja leukocita u komori za brojanje

- Brojanje leukocita u hematološkim analizatorima

Određivanje broja leukocita u komori za brojanje.

- Brojanje leukocita pod mikroskopom provodi se nakon liziranja crvenih krvnih stanica u 100 velikih kvadrata mreže za brojanje i ponovno izračunava se za 1 litru krvi, na temelju volumena kvadrata i razrjeđenja krvi. Broj leukocita treba uzeti u roku od 2-4 sata nakon uzimanja krvi.

- Ako u perifernoj krvi postoje stanice s nuklearnim stanicama, one se ne liziraju i broje zajedno s leukocitima. U ovom slučaju, da bi se odredio pravi broj leukocita, broj stanica u crvenom redu oduzima se od ukupnog broja prebrojenih stanica.

- Na primjer: Ukupan broj leukocita u izračunu u komori (ili analizatoru) -45x109 / l. Pri izračunavanju formule leukocita, nađeno je da je prisutno 50 eritroblasta (normoblasta) na 100 leukocita.

Izračunavamo pravi broj leukocita u krvi:

150 stanica - 45 x 109 / l

100 stanica (leukociti) - X

X = 100x45x10 / l / 150 = 30x10 / l

Dakle, pravi broj leukocita u krvi je 30 x 109 / l.

Glavni izvori pogrešaka u izračunu leukocita u komori:

- Neispravan omjer volumena krvi i octene kiseline u epruveti.

- Neispravno pripremljena otopina octene kiseline (u koncentraciji većoj od 5%, mogu se lizirati neki leukociti, što će dovesti do podcjenjivanja rezultata).

- Dugotrajno izlaganje uzorka na temperaturama iznad 28 ° C, što može ubrzati lizu leukocita u uzorku i dovesti do podcjenjivanja rezultata.

- Nepravilno punjenje komore Goryaev. Kao i kod izračuna crvenih krvnih zrnaca, fotoaparat treba ostaviti 1 minutu da se stanice slegnu.

- Kamera Goryaev nije bila dobro oprana nakon prethodne definicije. Leukociti koji ostaju u komori mogu precijeniti rezultate analize.

Metode brojanja trombocita

- u komori za brojanje

Svaka skupina metoda ima prednosti i nedostatke.

- Brojanje trombocita u komori je dovoljno precizno, ne zahtijeva izračunavanje broja crvenih krvnih stanica. S druge strane, ova metoda je zahtjevnija, jer su trombociti u izvornom obliku predstavljeni malim i slabo kontrastnim elementima. Nedostatak metode je brojanje trombocita u narednim satima nakon uzimanja krvi.

- Određivanje broja trombocita u razmazu krvi značajno je inferiorno po svojoj točnosti prema komornoj metodi ili automatskim brojačima. Pogreške u brojanju krvnih razmaza mogu biti uzrokovane lošom kvalitetom razmaza i povezanom neravnomjernom raspodjelom trombocita, netočnim određivanjem broja crvenih krvnih stanica. Značajan nedostatak metode je nužnost simultanog brojanja trombocita i crvenih krvnih stanica u krvi. Prednost je u mogućnosti proučavanja trombocita u bilo koje vrijeme, bez obzira na vrijeme prikupljanja krvi.

- Metoda određivanja trombocita pomoću hematološkog analizatora omogućuje točno određivanje broja trombocita, njihovog prosječnog volumena i raspodjele po volumenu.

Jedinstvena metoda brojanja broja leukocita krvi u komori za brojanje;

Metode brojanja broja leukocita u krvi

Unified 2 metode za određivanje broja leukocita u krvi:

- u komori za brojanje;

- pomoću hematoloških analizatora.

Princip Leukociti se broje pod mikroskopom u određenom volumenu komore za brojanje uz konstantno razrjeđivanje krvi nakon uništenja crvenih krvnih stanica.

Reagens: 3-5% otopina octene kiseline, obojena s vodenom otopinom metilenskog plavog do boje jezgre leukocita i olakšava njihovo brojanje. Otopina je plave boje, stabilna u skladištu.

Posebna oprema: mikroskop, komora za brojanje Goryaeva.

Tijek određivanja. Pomoću mjerne pipete ili automatskog dozatora, točno 0,4 ml otopine octene kiseline ulijeva se u epruvetu za aglutinaciju i u nju se dodaje 0,02 ml (Sali kapilara) krvi. Isperite kapilaru nekoliko puta s otopinom kiseline i pomiješajte sadržaj epruvete. To rezultira razrjeđivanjem krvi 20 puta. Ostavite do brojanja, ali ne više od 2-4 sata nakon uzimanja krvi. Komora Goryaev je spremna za rad brisanjem pokrivnog stakla tako da se pojavljuju duginih prstena. Još jednom dobro protresite sadržaj epruvete i napunite komoru Goryaev s ovom mješavinom pomoću Pasteurove pipete ili staklene šipke s rastaljenim krajem. Napunjenu komoru za brojanje ostavite 1 minutu u vodoravnom položaju za taloženje leukocita. Leukociti se broje u 100 velikih ne-grafiranih kvadrata komore za brojanje pod uvjetima: kondenzator se spušta, okular 10x ili 15x, leća 8x. Brojanje počinje od gornjeg lijevog kuta mreže Goryaev kamera. Prilikom brojanja leukocita, oni se rukovode pravilom: sve stanice unutar kvadrata i na crtama razgraničenja broje se ako one uglavnom idu unutar kvadrata. Ćelije ispresijecane razdjelnicom točno na pola, broje se samo na dvije strane kvadrata (na primjer, lijevo i gornje).

Proračun. Pri izračunavanju broja leukocita u 1 μl krvi, koristite formulu:

- broj leukocita u 1 ml krvi;

a - broj leukocita, izračunat u 100 velikih kvadrata;

4000 - faktor konverzije volumena do 1 µl, na temelju volumena malog kvadrata, koji je µl;

1600 - broj brojenih malih kvadrata;

20 - razrjeđenje krvi.

Da bi se broj leukocita pretvorio u SI jedinice (u 1 l krvi), dobiveni broj se množi s 10 6.

Praktično za određivanje sadržaja leukocita u 1 l krvi broj leukocita, izračunat u 100 velikih kvadrata komore za brojanje, množi se s 50, podijeljeno s 1000 (to jest, prebacuje se u zarez za 3 znaka ulijevo) i pomnoženo s 10 9.

Metode brojanja leukocita u komori Goryaev, norme pokazatelja i odstupanja

Komora Goryaev je uređaj za mjerenje broja stanica i čestica u određenom volumenu tekućine (krv, urin), koji se sastoji od posebnog debelog predmeta i pokrovnog stakla.

Stakleni tobogan ima udubljenu površinu u sredini, na koju se nanosi rešetka od 225 velikih kvadrata. Od tih kvadrata, 25 su ravnomjerno podijeljeni u 16 manjih kvadrata. Zbog tog volumena mreže izračun se obavlja točnije nego u drugim ručnim uređajima za brojanje.

Usluga kamere

Nakon upotrebe instrumenta, klizač se dezinficira uranjanjem u 4% -tnu otopinu formalina tijekom jednog sata ili u 70% -tnoj otopini etanola pola sata. Nakon toga se komora temeljito ispere destiliranom vodom. Višak tekućine uklanja se mekom krpom. Vrijedno je obratiti pozornost na činjenicu da se fotoaparat ne može obrisati pamučnim štapićem zbog vlakana koja se na njoj drže. Pohranjeno staklo na suhom mjestu.

Prilikom korištenja kamere izračunavaju se PE-ovi koji se nalaze unutar kvadrata rešetke i na gornjoj i lijevoj strani perimetra. U ovom slučaju, čestice koje dodiruju desnu i donju crtu perimetra za vrijeme izračuna ove ćelije nisu uključene.

Određivanje leukocita u krvi

Metoda brojanja leukocita

Izračunavanje broja leukocita započinje razrjeđivanjem krvi u 3-5% -tnoj otopini etanonske kiseline s metilnim plavim 20 puta. Radni materijal prije uporabe obrišite gazom.

Pokrovno staklo mora se obrisati prije pojave Newtonovih obojenih prstena. Zatim se komora napuni razrijeđenom krvlju, dok se prve dvije kapi ispuštaju na filter papir. Tekućina ulazi u komoru zbog kapilarnog svojstva vode. Važno je osigurati da se ništa ne ulije u utore pri punjenju. Ako se to dogodi, tekućina se nježno ukloni s filter papirom. Onda ostavite mrežu na minutu, čekajući da FE prekine kretanje.

Broj bijelih krvnih stanica odvija se unutar stotinu velikih kvadrata pri malom povećanju, to jest, s okulara 10x i objektivnim 8x, prema Egorovljevom pravilu. Rezultat se koristi u formuli.

X = (n × 250 × 20) / 100 ili X = n × 50

X - broj leukocita.

n je broj dobiven brojanjem u komori.

Određuje se broj leukocita, uzimajući u obzir broj velikih kvadrata mreže - 100 i razrjeđivanje krvi - 20.

Kako je broj leukocita

Brzina i abnormalnosti leukocita

Stopa leukocita kod ljudi je 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Ili, drugačije, oko 6.000 bijelih krvnih stanica nalazi se u 1 kubičnom mm krvi.

Vanjski fiziološki čimbenici mogu utjecati na odstupanja od norme:

  • unos hrane prije davanja krvi;
  • stres;
  • trudnoća ili menstruacija u žena;
  • hipotermija ili pregrijavanje;
  • veliki fizički napor prije testiranja.

Ako je broj bijelih krvnih stanica veći od 9,0 × 10⁹ / l (leukociti su povišeni), to se stanje naziva leukocitoza. Slična slika može se vidjeti kod malignih bolesti krvi, infekcija, oštećenja zračenja i trovanja.

Lijekovi također mogu povećati broj leukocita. Nekroza tkiva, teška krvarenja, uključujući i kao posljedica operacija, bubrežne kome, srčane bolesti - sve to može dovesti do leukocitoze.

Pad broja leukocita ispod 3,9 × 10⁹ / l naziva se leukopenija. Međutim, kod nekih osoba fiksni broj leukocita je fiksiran na 3,5 × 10⁹ / l. Vjeruje se da takvi ljudi održavaju rezerve tih stanica u tkivima 50 puta više nego u krvi. Nakon davanja analgetika, sulfonamida i drugih lijekova, nakon dugotrajnog mišićnog rada, kao posljedica infekcije i virusa (tifus, gripa i ospice), javlja se i funkcionalna leukopenija.

Leukocitna formula

Sve vrste leukocita tvore leukocitnu formulu. Na njemu možete prepoznati određene patologije. Norme formule variraju ovisno o dobi i razdoblju života osobe. Promjena je jasno vidljiva kod žena tijekom trudnoće ili nakon poroda.

Za izračunavanje omjera tipova tih stanica koriste se različite metode, ali sve se odnose na činjenicu da se teže stanice (npr. Bazofili) nalaze bliže rubu razmaza, a limfociti, poput svjetlosnih stanica, ostaju u sredini.

  • Filipchenko metoda. U ovoj metodi izračun se provodi duž poprečne ravne crte granice od jednog kraja do drugog. Udar je mentalno podijeljen na tri dijela.
  • Schillingova metoda. Leukociti se broje u četiri područja razmaza.

Dobiveni podaci zabilježeni su u tablici. Pojedinačno se broj svake vrste bijelih krvnih stanica izračunava pomoću formula. Označili su one elemente koji su se pojavili. Rezultat se čuva do trenutka dok zbroj svih prebrojanih stanica ne bude 100.

Metode brojanja leukocita u urinu

U urinu se izračunava broj leukocita u stanici Goryaeva Nechiporenko. Ova je analiza potrebna za praćenje bolesti bubrega. Periodično ispitivanje mokraće pomaže u praćenju ispravnosti liječenja i učinkovitosti propisane terapije.

Skupljanje urina

U studiji je samo prvi jutarnji urin usred uriniranja. Važno je da pacijent slijedi osnovna pravila za prikupljanje ovog biomaterijala. Posebna dodatna obuka za studij nije potrebna.

Metoda izračuna

10 ml svježe sakupljenog urina centrifugira se tri minute pri 2.500 okretaja u minuti. Prije toga, potrebno je osigurati da urin, kako bi se izbjegao djelomični raspad stanica, ima slabo kiselu reakciju.

Pomoću pipete s uskim, povučenim krajem, uklonite gornji sloj. In vitro ostavite 0,5 ml urina na 1 ml, ovisno o volumenu sedimenta.

Precipitat se blago miješa sa supernatantom. Dobivena otopina se koristi za punjenje Goryaevove komore za brojanje prema sličnom principu, koji se koristi pri izračunavanju PV krvi. Fotoaparat ostaje na miru 3 do 5 minuta.

Bijele krvne stanice moraju se brojati na velikim kvadratima po cijeloj rešetki sa 7x okularom i objektivom od 40x.

Rezultat se koristi u formuli:

X = (a / 0,9) × (1000 / V)

X - broj leukocita u 1 ml urina.

a - izračunata količina podijeljena s volumenom komore u 1 μl sedimenta urina.

v - Količina urina uzeta za istraživanje.

1000 - količina sedimenta.

Ovo je važno! Norma leukocita: u 1 ml urina ne više od 2 × 10³ bijelih krvnih stanica.

Broj leukocita u krvi

Osoblje laboratorija za otkrivanje broja leukocita najčešće koristi komoru Goryaev. Brojanje leukocita u komori Goryaev je manje precizna metoda od određivanja leukocita pomoću elektroničkih uređaja. Veličina pogreške je ± 7%.

Kako se radi brojanje

  1. U epruvetu uliti 0,4 ml tekućine za razrjeđivanje, kao i 0,02 mililitra kapilarne krvi. Uzgoj se smatra jednakim 1:20.
  2. Kao tekućina za razrjeđivanje obično se koristi 3 ili 5% -tna otopina octene kiseline. To je prethodno obojeno s metilenskim plavim, koje reakcijom boji jezgre leukocita.
  3. Prije punjenja komore, Goryaev cijev se trese što temeljitije. Punjenje kamere je isto kao i za brojanje crvenih krvnih stanica.

Značajke proračuna

Po broju leukocita koji su značajno slabiji od crvenih krvnih stanica, proračun se radi u 100 velikih kvadrata. U 100 kvadrata, izračunato je broj leukocita.

Uz volumen malog kvadrata od 14.000 kubnih milimetara i 20-struko razrjeđenje krvi, broj leukocita izračunava se na sljedeći način: 4000x20, a zatim se dijeli na 1600. Ispada 1/2 x a.

Da biste dobili broj bijelih krvnih stanica u 1 µl, izračunati iznos treba podijeliti s 2 i dodati još dva nula.

Odstupanje leukocita od razine ukazuje na leukocitozu i leukopeniju, te zahtijeva hitno detaljno ispitivanje, budući da postoji velika vjerojatnost prisutnosti tuberkuloze, upale pluća, sepse, tifusa, zračenja.