Jetra je središnji laboratorij tijela. Sintetizira proteine (albumin, protrombin, fibrinogen, druge faktore zgrušavanja krvi), nastaju lipidi (kolesterol), lipoproteini, žučne kiseline, bilirubin, žuč. Toksične tvari koje se javljaju u tijelu i ulaze u tijelo (antitoksična funkcija) koriste se u jetri. Jetra sintetizira glikogen i uključena je u gušteraču u regulaciji rezervi ugljikohidrata u tijelu. Njegova aktivna uloga u probavi je da žuč emulgira masti i poboljšava njihovu razgradnju lipaze pankreasa. Proizvodi za cijepanje hrane (masti, masne kiseline, glicerin, aminokiseline, ugljikohidrati, minerali, voda, vitamini) ulaze kroz žile portalne vene u jetru. U njemu su djelomično deponirani, djelomično obrađeni, korišteni i djelomično pripremljeni za upotrebu u drugim tkivima.
Bolesti jetre uzrokuju poremećaje jedne ili druge funkcije, koja se koristi u dijagnostičke svrhe. Najčešće se provodi u kliničkim laboratorijima studije poremećaja pigmenta, ugljikohidrata, funkcija stvaranja proteina. Kod akutnih upalnih i toksičnih oštećenja jetre iz jetre se oslobađa značajna količina intracelularnih enzima. Ispitivanja aldolaze, alanina i aspartinskih transaminaza (aminoferaza), laktat dehidrogenaze i njenih frakcija, kolinesteraza, arginaza i drugih pokazala su dijagnostičku vrijednost, a indikatori aktivnosti aldolaze i transaminaza koriste se za dijagnosticiranje upalnih bolesti jetre, intoksikacije, uz akutnu distrofiju njezinih uzoraka, kao i njezine obrasce. fosfataze proizvedene u koštanom tkivu. Pokazatelji njegove aktivnosti koriste se u dijagnostici opstruktivne žutice. Proučavanje enzimskog spektra krvi koristi se u diferencijalnoj dijagnozi različitih bolesti jetre, osobito žutice.
U nastavku su prikazane osnovne informacije o dijagnostičkoj vrijednosti najpoznatijih uzoraka, koje odražavaju stanje jetre u normalnim i patološkim stanjima. Metode nekih uzoraka ili načela njihove primjene dane su ako metode zahtijevaju detaljan opis. Biokemijske metode za proučavanje funkcije jetre nalaze se u sljedećim publikacijama: Smjernice za primjenu standardiziranih kliničkih i laboratorijskih metoda istraživanja.
Funkcionalni testovi koji odražavaju ulogu jetre u metabolizmu ugljikohidrata. Kod bolesti jetre, razina šećera u krvi natašte je u većini bolesnika normalna - 4,44-6,11 mmol / l (80-110 mg%). Povremeno dolazi do hiperglikemije, često zbog disfunkcije simpatoadrenalnog vegetativnog živčanog sustava. Kod ciroze jetre, kada je sinteza glikogena poremećena i njezine rezerve značajno iscrpljene, može doći do hipoglikemije.
Uzorci za toleranciju na ugljikohidrate s opterećenjem glukozom izvode se na isti način kao u proučavanju funkcije otočnog aparata. Test se uglavnom koristi s jednim punjenjem glukoze (šećer, fruktoza, levuloza).
Galaktozurni test temelji se na činjenici da je galaktoza teža od glukoze, pretvara se u glikogen, au slučaju bolesti jetre u većoj se količini izlučuje putem bubrega. Uneseno je 40 g galaktoze unutar 200 ml vode. Zatim se urin sakuplja u tri odvojene porcije svaka 2 sata, te se tijekom 6 sati otpušta 2-2,5 g galaktoze. Prema A. I. Khazanovu (1968), kod kroničnog hepatitisa test je pozitivan u 4-12% bolesnika, au slučaju ciroze jetre kod 47,1% bolesnika.
Galaktosemijske krivulje osjetljivije su od galaktozurnog uzorka. Prazan želudac kod zdrave osobe sadrži 0,1–0,9 mmol / L u krvi ili 2–17 mg% galaktoze. Nakon opterećenja od 40 g galaktoze kod zdrave osobe, uočava se nagli porast razine galaktoze na 6,6 mmol / l, odnosno 120 mg% tijekom 30–60 minuta, a zatim nakon 2–3 sata, pokazatelj se smanjuje na 2,20 mmol / l, ili 40 mg%. Kod osoba s bolestima jetre razina galaktoze je veća, traje duže i ne vraća se u normalu nakon 3 sata.
Funkcionalni testovi koji odražavaju ulogu jetre u metabolizmu lipida. Jetra je uključena u sve faze metabolizma masti. Za normalnu apsorpciju masti u crijevima potrebna je žuč. Djeluje kao deterdžent i emulgator za masti, olakšava rad lipaze pankreasa, poboljšava apsorpciju masti u crijevu. U jetri se fosfolipidi sintetiziraju u prisutnosti lipotropnih tvari koje djeluju kao donatori lipidnih skupina (metionin, holin) ili faktor koji doprinosi sintezi fosfolipida (vitamin B).12). U nedostatku lipotropnih tvari u jetri akumuliraju se neutralne masti, a količina glikogena se smanjuje. Kod bolesti jetre smanjuje se sadržaj adenozin trifosfata, koji daje energiju za sintetske procese.
Razina kolesterola u krvi je najvažniji pokazatelj sinteze lipida u jetri. Kolesterol se uzima s hranom. Njegova apsorpcija u crijevu nastaje uz sudjelovanje žučnih kiselina. Međutim, prehrambeni kolesterol nije jedini ili čak glavni izvor kolesterola u tijelu. Neprekidno se sintetizira u jetri iz acetilkoenzima A. Sinteza kolesterola premašuje njegov unos. Višak sintetiziranog i prehrambenog kolesterola izlučuje se iz tijela kroz crijeva. Dio se u jetri pretvara u žučnu kiselinu, a koristi se iu drugim organima (nadbubrežne žlijezde, testisi) kao polazni materijal za sintezu steroidnih hormona. Dio kolesterola se u jetri kombinira s masnim kiselinama kako bi se oblikovali esteri kolesterola.
Sadržaj kolesterola u krvi određuje se metodom Ilka. Kolesterol se prethodno ekstrahira s kloroformom. U prisutnosti anhidrida octene kiseline i mješavine octene i sumporne kiseline, otopini se daje zelena boja. Koncentracija kolesterola određena je kalorimetrijskom metodom na FEC. U zdravih ljudi serum sadrži 3,0-6,5 mmol / l (116-150 mg%) kolesterola. U hepatitisa i ciroze jetre, postoji kršenje kolesterola u krvi: hiperkolesterolemija, očito povezana s povredom izlučivačke funkcije jetre, rjeđe - hipokolesterolemija, povezana s smanjenjem njegove sinteze u jetri.
Esteri kolesterola u hepatitisu formiraju se u manjim količinama od normalnih, a omjer estera i kolesterola smanjuje se na zdravih 0,3-0,4 umjesto 0,5-0,7.
Sinteza lipoproteina u jetri je također vrlo niska i visoka gustoća. Hilomikroni i mali dio lipoproteina vrlo niske gustoće nastaju u epitelnim stanicama tankog crijeva. Sinteza i razgradnja lipoproteina odvija se uz sudjelovanje lipoprotein lipaze, koja je povezana s heparinom. Primijećeno je da se u slučaju ciroze jetre sadržaj heparina u krvi smanjuje. Dakle, jetra je uključena kako u formiranje lipoproteina, tako iu njihovo uništavanje. Kod bolesti jetre postoji dislipoproteinemija, uglavnom povećana formacija lipoproteina (hepatitis, početni oblici ciroze jetre). Povećana je razina beta-lipoproteina u krvi.
Proučavanje lipoproteina u krvi provodi se uglavnom elektroforetskom metodom.
Metabolizam intersticijskog lipoproteina je narušen kod teških bolesti jetre - jetrene kome, ciroze jetre. U ovom slučaju, sadržaj mliječne (norma je 0,78-1,2 mmol / l (7-14 mg%) i piruvične kiseline (norma je 57–136 µmol / l (0,5-1,2 mg%)) povećava se u krvi.,
Kada je jetrena koma otkrivena povišena razina acetona u krvi.
Funkcionalni testovi koji odražavaju ulogu jetre u metabolizmu proteina. Jetra transaminira aminokiseline, oksidira ih u piruvičnu kiselinu u ciklusu trikarboksilne kiseline (Krebs) i sintezu proteina. Svi albumini, 75-90% alfa globulina, 50% beta globulina sintetizirani su u jetri. Zdrava jetra može proizvesti 13-18 g albumina dnevno. Protrombin, prokonvertin, proakcelerin sintetizira se samo u jetri. Sinteza proteina odvija se uz sudjelovanje energije. Jedan od razloga smanjenja sintetske funkcije jetre je smanjenje sadržaja mikroergičkih spojeva u njoj. Kod teškog oboljenja jetre ukupna količina proteina sirutke može pasti na. 40 g / l umjesto 80 g / l. Sadržaj albumina značajno se smanjuje (do 20 g / l umjesto 40 g / l). U patološkim uvjetima, jetre sintetiziraju globuline s neobičnim svojstvima (paraproteini). Poznato je da je takav protein slabije obojen s biuretnim reagensom, manje stabilnim u fiziološkoj otopini (na primjer, kalcijev klorid), u prisutnosti timola. Ovim svojstvima izgrađeni su sedimentni dijagnostički uzorci.
Ukupni serumski protein određen je polarimetrijskom metodom ili u reakciji s biuretnim reagensom. Norma - 60-80 g / l. Proteinske frakcije se uspostavljaju elektroforezom na papiru ili u gelu akrilamida. Sadržaj albumina u krvnom serumu je, prema V. E. Predtechenskom, 56,5–66,8%, alfarglobulin - 3,0—5,6, alfagglobulin - 6,9—10,5, beta-globulin - 7,3. - 12,5 i gama globulini - 12,8–19,0%. Kod bolesti jetre dolazi do smanjenja sadržaja albumina u krvi, što povećava sadržaj gama globulina. Kod akutnih upalnih procesa (hepatitis), razina alfa-globulina se povećava 1,5-2 puta. Gama globuline proizvode limfociti i stanice retikuloendotelnog sustava. Kod kroničnog hepatitisa koji se javlja s naglašenim autoimunim procesima, sadržaj gama globulina u krvi se značajno povećava (do 30%). A. I. Khazanov primjećuje da je značajno povećanje beta ili gama globulina zabilježeno u bolesnika s dekensirovanom cirozom jetre i često ukazuje na lošu prognozu bolesti. On odražava reorganizaciju sinteze proteina u jetri i povećanu formaciju paraproteina.
Sedimentni uzorci temelje se na promjenama koloidne stabilnosti krvnog seruma u interakciji s različitim elektrolitima. Stabilnost koloidnog krvnog sustava poremećena je kao posljedica disproteinemije i paraproteinemije.
Sublimatni test (sublimatno-sedimentna reakcija), Takat-Ara reakcija, sastoji se u tome da se tijekom interakcije sublimata i natrijevog karbonata s proteinima krvnog seruma precipitiraju, formirajući pahuljice. Trenutno se reakcija koristi u modifikaciji Grinstedta (1948). U 0,5 ml neemoliziranog seruma razrijeđenog s 1 ml fiziološke otopine dodaje se 0,1% -tna otopina sublimiranih kapljica dok se ne pojavi uporna zamućenost, kada čitanje novinskog teksta postane nemoguće preko vertikalnog sloja tekućine. Stopa je 1,6-2,2 ml 0,1% -tne otopine živinog klorida. Test je pozitivan u parenhimskom oštećenju jetre, osobito u cirozi jetre, akutnom i kroničnom hepatitisu, silikozi i silikotuberkulozi.
Veltmannov test (koagulacijski test, reakcija termokagulacije) predložen je 1930. godine kako bi se razlikovali fibro-produktivni i nekrotični procesi u jetri. Svježi serum bez tragova hemolize uliven je u 11 cijevi od 0,1 ml. Zatim se doda 5 ml otopine kalcijevog klorida u sniženim koncentracijama: 0,1, 0,09, 0,08, itd., Na 0,01%, sadržaj epruveta se lagano protrese i stavi u kipuću vodenu kupelj 15 minuta, nakon čega rezultat je označen. Uzorak se smatra pozitivnim u slučaju precipitacije proteina. Broj epruveta s pozitivnim rezultatom naziva se koagulacijska traka. Normalno, to je 6-7 cijevi. Smanjenje (pomak ulijevo) uočava se kod upalnih procesa u plućima, tumora, infarkta miokarda; produljenje (pomak u desno) - kod upalnih procesa u jetri, akutne distrofije jetre, ciroze, kao i hemolitičke bolesti, nefroze, fibrozne plućne tuberkuloze. Trenutno, Veltmannov uzorak je modificiran kako slijedi: dodaje se 4,9 ml vode u 0,1 ml krvnog seruma, zatim se doda 0,1 ml 0,5% -tne otopine kalcijevog klorida. Smjesa se zagrijava do ključanja, u odsutnosti precipitata, ulije se još 0,1 ml otopine kalcijevog klorida. Postupak se ponavlja sve dok se ne pojavi mišji protein u epruveti. Rezultati se procjenjuju na ukupnu količinu kalcijevog klorida potrošenog na reakciju. Obično je potrebno 0,4-0,5 ml kalcijevog klorida.
Thymol test (test zamućenja timola) u modifikaciji Huerg i Popper (timol-toner test) temelji se na formiranju zamućenosti test seruma u prisutnosti zasićene otopine timola u veronalnom puferu. Precipitat nastaje kao posljedica pojave globulin-timolofosfatidnog kompleksa sa smanjenjem sadržaja albumina u krvi, povećanjem beta i gama globulina. Stupanj zamućenosti ovisi o temperaturi okoline i pH. Reakcija se procjenjuje fotokalorimetrijskom metodom na 660 nm prema timol-meronalnoj otopini. Izračun se provodi prema kalibracijskoj krivulji iz suspenzije barijevog sulfata. Uobičajeno, zamućenost seruma je 0 - 5 jedinica. M (Maklagana). Uočeno je povećanje zamućenosti (pozitivan test) u uvjetima oštećenja jetre u epidemijskom hepatitisu (test je pozitivan prije razvoja žutice), u cirozi jetre, nakon akutnog hepatitisa, i tako dalje.
Kod teških povreda jetre poremećen je proces deaminacije aminokiselina, što dovodi do povećanja njihovog sadržaja u krvi i urinu. Ako je u zdravih ljudi sadržaj amino dušika u serumu 50-80 mg / l, onda s teškim distrofičnim procesima u jetri može se povećati na 300 mg / l (300 mg / l odgovara 30 mg% omjera prijenosa amino dušika, izraženo u mg%, u mmol / l je 0.7139). A. I. Khazanov primjećuje da se u akutnom virusnom hepatitisu povećavaju serumske razine glutationa, glutaminske kiseline, metionina, fenilalanina, serina i treonina. Kod kroničnog hepatitisa otkrivene su iste promjene u sadržaju aminokiselina u krvi, ali izražene u manjoj mjeri.
Tijekom dana, 100-400 mg (prosječno 200 mg) aminokiselina izlučuje se urinom zdrave osobe. Aminoazot je među njima 1-2% ukupnog dušika urina, a kod bolesti jetre 5-10%. Kod akutne jetrene distrofije uočava se povećano izlučivanje leucina i tirozina u urinu. Obično se otpušta tirozin u količini od 10-20 mg / l, s akutnim virusnim hepatitisom - do 1000 mg / l (2 g dnevno). U sedimentu urina mogu se naći kristali leucina i tirozina.
Preostali dušik i urea u krvnom serumu kod bolesti jetre se povećavaju ako se razvije akutni hepatorenalni neuspjeh ili ozbiljno akutno oštećenje jetre (akutna distrofija kod akutnog hepatitisa, pogoršanje kroničnog hepatitisa, ciroza jetre, karcinom jetre, nakon operacije bilijarnog trakta i et al.). Kod zdravih ljudi, rezidualni dušik u krvi je 14,3–28,6 mmol / l (0,20–0,40 g / l), urea - 2,5–3,3 mmol / l (0,15—0, 20 g / l). Kod bolesti jetre, sadržaj preostalog dušika u krvi neznatno raste - do 35,4-64,3 mmol / l (0,50 - 0,90 g / l). Porast njegove razine iznad 71,4 mmol / l (1,0 g / l) uočen je kod oštećenja bubrega i značajno pogoršava prognozu bolesti.
Rezidualni dušik u krvi određuje se na nekoliko načina - nakon mineralizacije krvi izravnom reakcijom s Nesslerovim reagensom ili metodom Rappoport-Eichgorn hypobromite. Urea se u krvi određuje i na nekoliko načina: ekspresna metoda temelji se na upotrebi reaktivnog papira "Ureatest", koristi se metoda ureaze s fenol hipokloridom, metoda ureaze s Nesslerovim reagensom itd.
Jetra i hemostaza su usko povezani. U jetri se sintetiziraju proteini koji su uključeni u zgrušavanje krvi. Najvažniji od njih su protrombin i fibrinogen, a kršenja sinteze ovih proteina su češća. Treba napomenuti da se kod akutnih upalnih bolesti pluća, zglobova, jetre, sadržaj fibrinogena u krvi može značajno povećati. Smanjenje sadržaja protrombina u krvi uočeno je u bolesnika s akutnim virusnim, toksičnim, kroničnim hepatitisom, cirozom jetre. Najvažniji klinički znakovi nedostatka protrombina su spontana krvarenja pod kožom, ispod sluznice, krvarenje usne šupljine, želudac.
Sinteza proteina koja osigurava proces zgrušavanja krvi događa se uz sudjelovanje vitamina K. Vitamin K je topljiv u mastima i ulazi u tijelo zajedno s mastima. Kod bolesti jetre zbog poremećaja formiranja žuči i izlučivanja žuči u tijelu dolazi do hipovitaminoze K.
Smanjena sinteza faktora zgrušavanja krvi može biti povezana s inhibicijom funkcije jetre koja stvara proteine. U ovom slučaju dolazi do hipoprotrombinemije s dovoljnim opskrbom tijela vitaminom K. U klinici za dijagnostičke svrhe količina protrombina u krvi ispituje se prije i nakon nanošenja s Vikasolom.
U jetri i plućima sintetizira se velika količina heparina.
Pitanje mogućnosti hemoragijske dijateze, povezane s povećanjem proizvodnje antikoagulantnih čimbenika krvnog sustava u bolestima jetre, nije dobro shvaćeno.
Aktivnost faktora protrombinskog kompleksa (protrombi-novi indeks) proučava se metodom Quick (95–105% norma), a koncentracija fibrinogena u krvi ispituje se Rutberg-ovom metodom (norma je 200-300 mg u 100 ml plazme). Prema jedinstvenoj gravimetrijskoj metodi koju je preporučio V. V. Menshikov (1987), stopa fibrinogena u krvi iznosi 200–400 mg%, ili 2–4 g / l. Metoda određivanja faktora zgrušavanja krvi detaljno je opisana u Priručniku o kliničkim i laboratorijskim metodama istraživanja.
Funkcionalni testovi koji odražavaju ulogu jetre u metabolizmu pigmenta. To je prvenstveno određivanje bilirubina u serumu, proučavanje urobilina, stercobilina, žučnih pigmenata u urinu. Već smo spomenuli proučavanje sadržaja bilirubina u žuči. Ovi pokazatelji izravno ili neizravno odražavaju proces pretvorbe bilirubina u jetru. Jetra igra važnu ulogu u metabolizmu pigmenata koji sadrže željezo - hemoglobina, mioglobina, citokroma itd.
Početni stupanj razgradnje hemoglobina je razbijanje metilnog mosta i stvaranje verdohemoglobina (verdoglobina), koji također sadrži željezo i globin. U budućnosti, Verdoglobin gubi željezo i globin, započinje proces razvijanja porfirinskog prstena i formiranje biliverdina, čijim se obranom formira glavni žučni pigment - bilirubin (neizravni, nevezani bilirubin). Takav bilirubin se kombinira s Ehrlichovim diazoreaktivnim nakon tretmana s alkoholom ili kofeinskim reagensom, tj. Daje indirektnu reakciju boje. Aktivno se apsorbira u hepatocitima i uz pomoć enzima glukuroniltransferaze u Golgijevom aparatu povezane su s jednom (monoglukuronidnom) ili s dvije (diglucuronide) molekulom glukuronske kiseline. Petnaest posto bilirubina u jetri preko sulfatne transferaze sa sumpornom kiselinom i fosfoadenozin fosfosulfata. Takav bilirubin brzo reagira s diazoreaktivnim i daje izravnu reakciju.
Kod bolesti jetre, povišen sadržaj bilirubina u krvi uglavnom je određen činjenicom da ga hepatociti izlučuju u žuč i krvne kapilare. Bilirubin se nakuplja u krvi, davajući izravnu reakciju s diazoreaktivnim (izravnim ili vezanim bilirubinom). Manja količina također sadrži bilirubin u slučaju teškog oštećenja jetre, što daje neizravnu reakciju, koja je uzrokovana smanjenjem aktivnosti hvatanja nekonjugiranog bilirubina iz krvi u stanici jetre i očito je zbog kršenja mehanizma unosa i apsorpcije bilirubina u školjkama hepatocita.
Kada opstrukcija zajedničke žuči ili jetre kanal od kamena, tumora, viskozne sluzi, sužavanje lumena od ožiljaka (na primjer, nakon operacije na žučnim putem) u jetrenim žučnim kanalima povećava pritisak žuči. Ona prodire u krvne i limfne kapilare. U krvi se nakuplja uglavnom bilirubin, koji daje izravnu reakciju s diazoreaktivnim (subhepatičnim, ili mehaničkim, žuticom).
Hemolizu eritrocita prati oslobađanje velike količine hemoglobina, dio se izlučuje putem bubrega, neki se hvataju u stanice retikuloendotelnog sustava i pretvaraju u verdoglobin i bilirubin. Dio takvog bilirubina je konjugiran s glukoronskom kiselinom u jetri i izlučuje se povećanom količinom žuči u crijevo. Međutim, značajna količina bilirubina zadržana je u krvi, što daje indirektnu reakciju. Takva žutica se naziva hemolitička, ili nadhepatična.
Kod opstruktivne žutice vrlo malo žuči (bilirubin) ulazi u crijeva ili uopće ne ulazi. Boja fecesa ovisi o proizvodima pretvorbe bilirubina - stercobilina, koji se formira u crijevu iz stercobilinogena - međuproizvod pretvorbe bilirubina. Ako žučni pigmenti ne ulaze u crijevo, izmet postaje lagan, bijel, acholichny. Reakcija na stercobilin i urobilin u takvim je slučajevima negativna.
U parenhimatnoj žutici, žučni pigmenti ulaze u crijevo u manjim količinama nego što je to uobičajeno, jer se sadržaj bilirubina u žuči smanjuje, a količina žuči je mala. Međutim, bilirubin koji ulazi u crijevo je dovoljan da boji izmet u svijetlo smeđoj boji. Dio stercobilina se apsorbira i izlučuje putem bubrega, najprije u obliku urobilinogena, a zatim urobilina. Kada je konjugirani (izravni) bilirubin pretjeran u krvi, dio ulazi u urin, gdje ga može otkriti kaša (s alkoholnom otopinom joda) ili uzorak s taloženjem bilirubina pomoću soli barija.
S hemolitičkom žuticom u žuči povećava se razina bilirubina. Sterobilin i urobilin također se formiraju u višku - izmet i urin su intenzivno obojeni. U krvi se povećava sadržaj nevezanog bilirubina, slabo se topiva u vodi, ne prodire kroz bubrežnu barijeru u tkivo. Stoga u urinu nema bilirubina.
Serumski bilirubin određen je metodom Endrašík, Cleghorn i Grof. Ova metoda temelji se na kombinaciji diazofenil sulfonske kiseline (nastale interakcijom sulfanilne kiseline s natrijevim nitritom) sa serumskim bilirubinom, što rezultira ružičasto-ljubičastim bojanjem. Intenzitet njegovog prosuđivanja o koncentraciji bilirubina, ulazi u izravnu reakciju. Kada se u serum doda kofeinski reagens, nekonjugirani (indirektni) bilirubin prelazi u topljivo disocirano stanje i daje dijoremskoj smjesi ružičasto-ljubičastu otopinu za bojenje. Tehnika je opisana u priručniku V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov; Handbook ed. A. A. Pokrovsky; metodičke upute izd. V. V. Menshikov i drugi.
Vrijednost određenih enzima u dijagnostici bolesti jetre. Enzimi jetre, kao i drugi organi, podijeljeni su na organske i nespecifične. Za jetru, organski specifični enzimi su ornitin karbamil transferaza, glutamat dehidrogenaza, fosfofruktaldolaza, histidaza, sorbitol dehidrogenaza. Osim toga, peti izoenzim laktat dehidrogenaza smatra se specifičnim.
Jetrene stanice su bogate enzimima. Oštećenje hepatocita dovodi do oslobađanja značajne količine unutarstaničnih enzima i njihove akumulacije u krvi. U tom smislu, transaminaze, aldolaze i enzimi koji se nalaze u stanicama drugih organa i tkiva stekli su dijagnostičku vrijednost. Procijeniti njihovu aktivnost u krvi treba usporediti s kliničkim znakovima bolesti.
Aldolaza - skupni naziv enzima uključenih u mehanizme aerobnog razdvajanja ugljikohidrata. Serdna aldolaza katalizira reverzno cijepanje fruktoze-1,6-difosfata u dva fosfo-trioza-fosfogliceraldehida i dioksiaceton-monofosfata. Aktivnost aldolaze u serumu je povećana kod akutnog epidemijskog hepatitisa i, u manjoj mjeri, kod akutnog toksičnog hepatitisa. Kod akutnog virusnog hepatitisa u 90% bolesnika uočeno je 5-20-struko povećanje aktivnosti fruktoza difosfat aldolaze. Njegovo povećanje javlja se 3-15 dana prije pojave drugih kliničkih znakova bolesti. Nakon 5 dana od početka perioda žutice, aktivnost aldolaze se smanjuje. Povećanje aktivnosti aldolaze također je zabilježeno u slučaju anikternih oblika akutnog hepatitisa. U bolesnika s kroničnim upalnim procesima u jetri aktivnost aldolaze neznatno raste, a kod malog broja njih.
Proučavanje aktivnosti aldolaze u serumu provodi se prema metodi V.I. Tovarnitsky, E.N. Voluyskaya. Kod zdravih ljudi aktivnost ovog enzima ne prelazi 3-8 jedinica.
Aminotransferaze (transaminaze) često se koriste za dijagnosticiranje upalnih bolesti jetre. Aminotransferaze u ljudskom tijelu provode procese transaminacije (obrnuti prijenos amino skupina aminokiselina u keto kiseline). Istraživanje aktivnosti aspartat aminotransferaze (AST) i alanin aminotransferaze (ALT) od najveće je važnosti. Ovi enzimi su široko rasprostranjeni u različitim organima i tkivima - jetri, miokardiju, skeletnim mišićima, bubrezima itd. Povećanje aktivnosti aminotransferaza dobiva dijagnostičku vrijednost u usporedbi s kliničkim znakovima bolesti.
Istraživanje se provodi prema metodi Reitmana i Fraenkela. Norma za AST je 0,1–0,4 mmol / (h • l) (8–40 jedinica), a za AlT 0,1–0,68 mmol / (h • l) (5—30 jedinica), Trenutno, količina supstrata u molovima kataliziranim s 1 1 ispitne tekućine za 1 sat inkubacije na 37 ° C (mmol / (h • l)) uzima se kao jedinica enzimske aktivnosti, a jedinice ranije uzete enzimske aktivnosti pretvaraju se u naznačene pomoću sljedećih formula: za AsT - D / 88, za AlT - D2 / 88, gdje je D pokazatelj enzimske aktivnosti, izražen u staroj dimenziji (jedinice), 88 je faktor konverzije, numerički jednak molekulskoj masi piruvične kiseline.
Kod epidemijskog hepatitisa, aktivnost aminotransferaza raste s velikom konzistencijom iu ranim stadijima, čak i prije pojave žutice. Kod toksičnog hepatitisa i pogoršanje kronične aktivnosti aminotransferaza povećava se 3-5 puta. Promjene ciroze jetre nisu tako redovite.
Laktat dehidrogenaza (LDH) je glikolitički enzim koji reverzibilno katalizira oksidaciju 1-laktata u piruvičnu kiselinu. Za LDH je potreban nikotinamid-dinukleotid kao intermedijerni akceptor vodika. U serumu je detektirano pet izoenzima LDH. LDH, pronađen u miokardiju, LDH5 - u jetri. Petu frakciju enzima inhibira urea, a to svojstvo enzima olakšava njegovo određivanje.
Serumski LDH određen je metodom Sevel i Tovarek. Normalne vrijednosti ukupne serumske LDH aktivnosti su 0,8–4,0 mmol piruvične kiseline po litri seruma tijekom 1 sata inkubacije na 37 ° C. Urea-LDH čini 54-75% ukupnog LDH.
Također se koristi u kliničkim laboratorijima za određivanje LDH metodom elektroforeze krvnog seruma u poliakrilamidnom gelu. Metoda određivanja LDH može se naći u priručniku V. G. Kolba, V. S. Kamyshnikov. Kod virusnog hepatitisa, aktivnost LDH4 i LDH5 se povećava u prvih 10 dana kod svih pacijenata, stupanj njegovog povećanja ovisi o težini bolesti.
Kolinesteraze se nalaze u eritrocitima (acetilkolinesteraza) iu serumu (acil-hidrolaza acilholin). Oba enzima cijepaju kolinske estere u kolin i odgovarajuće kiseline i odlikuju se svojom specifičnošću. Acetilkolinesteraza hidrolizira samo acetilkolin (ranije nazvana prava kolinesteraza). Serumska kolinesteraza može se razgraditi zajedno s acetilkolinom i butirilkolinom (i 2 puta brže od acetilkolina). Stoga je poznat i kao butirilkolinesteraza ili lažno serumska kolinesteraza. Sintetizira se u jetri, a njegova se aktivnost koristi kao znak funkcionalne sposobnosti jetre.
Aktivnost serumske kolinesteraze određena je stupnjem hidrolize acetilkolin klorida u octenu kiselinu i kolinu. Količina otpuštene octene kiseline određuje se promjenom boje puferne otopine u prisutnosti indikatora kiselosti na FEC. Standard je 160–340 mmol / (h • l). U slučaju bolesti jetre (hepatitis, ciroza) sinteza serumske kolinesteraze se smanjuje. U bolesnika s opstruktivnom žuticom dolazi do smanjenja aktivnosti kolinesteraze samo kada se pojave znakovi teškog oštećenja jetre. Smanjuje se njegova aktivnost u hipoproteinemiji, kaheksiji, trovanju organofosfatnim otrovima, mišićnim relaksantima. U nekim slučajevima (hipertenzija, fibroidi maternice, peptički ulkus itd.) Uočava se povećanje aktivnosti kolinesteraze.
Gama-glutamiltranspeptidaza (G-GTP) razgrađuje kromogeni supstrat gama-glutamil-4-nitronilid i olakšava prijenos gama-glutamilnog ostatka na akceptorski dipeptid glicilglicin. Oslobođeni 4-nitroanilin određen je foto kalorimetrijskom metodom na 410 nm nakon zaustavljanja enzimske reakcije s octenom kiselinom.
GGTG se nalazi u svim ljudskim organima i tkivima. Aktivnost ovog enzima u bubrezima, jetri, gušterači, slezeni, mozgu je najviša (oko 220 mmol / h • l), u drugim organima (srce, skeletni mišići, pluća, crijeva) - mnogo niža (0,1-18 mmol / l) Najviša G-GTP aktivnost je zabilježena u žuči i urinu, a njegova serumska aktivnost je 4-6 puta niža nego u mokraći.U crvenim krvnim stanicama ovaj enzim je odsutan.G-GTP aktivnost u serumu zdravih muškaraca 0,9–6,3 mmol / (h • l), za žene - 0,6–3,96 mmol / (h • l) G-GTP aktivnost je povećana u cirozi jetre kod 90% bolesnika s DRŽAVNI u kroničnim hepatitisom - 75% u kroničnom cholangiohepatitis -. Gotovo svi pacijenti enzim aktivira etanol određivanje T-GTP osjetljivo ispitivanje u dijagnostici bolesti jetre alkohol toksični..
Alkalna fosfataza je jedna od hidrolaza koje fermentiraju organske spojeve, fosforne estere eliminacijom svojih ostataka. Aktivan je u mediju s pH od 8,6–10,1 i snažno se aktivira pod utjecajem iona magnezija. Alkalna fosfataza nalazi se u svim ljudskim tkivima i organima. Posebno mnogo toga u koštanom tkivu, parenhimu jetre, bubrezima, prostati, drugim žlijezdama, crijevnoj sluznici. Sadržaj alkalne fosfataze u djece je 1,5 do 3 puta veći nego u odraslih.
U agar gelu je korištena elektroforeza za izolaciju pet izoenzima alkalne fosfataze. Prvi se smatra specifičnim za jetru, drugi za koštano tkivo, peti za žučne puteve. Enzim se izlučuje iz jetre sa žučom.
Aktivnost alkalne fosfataze detektira se pomoću natrijevog beta-glicerofosfata, koji podliježe hidrolizi oslobađanjem anorganskog fosfora. Ovo posljednje je kriterij enzimske aktivnosti. Enzim se određuje u serumu prema Bodansky metodi. Normalno, aktivnost alkalne fosfataze je 0,5-1,3 mmol anorganskog fosfora na 1 litru seruma tijekom 1 sata inkubacije na 37 ° C.
Povećanje aktivnosti alkalne fosfataze događa se uglavnom u dva stanja: bolesti kostiju s proliferacijom osteoblasta i bolesti koje uključuju kolestazu. Povećana aktivnost alkalne fosfataze uočena je kod sljedećih bolesti kostiju: hiperparatiroidizma (Recklinghausen-ova bolest), sarkoma kosti, deformirajuće osteoze ili fibrozne osteodistrofije (Pagetova bolest) i drugih oblika osteoporoze. kamen, tumor, limfni čvorovi u raku bilijarnog trakta, želudac, kod osoba s upalnim bolestima jetre i bilijarnog trakta, gušterače, limfogranulomatoze, itd. stalan porast aktivnosti alkalne fosfataze promatrati u tumorima jetre, kroničnog hepatitisa i ciroze, akutnog hepatitisa, žutice i bez i žuticu. Aktivnost enzima se povećava ako se uključi mehanička komponenta žutice (kolangitis, kompresija zajedničkog jetrenog kanala regionalnim limfnim čvorovima, čvorovi regenerirajuće jetre u području vrata). Dakle, povećanje aktivnosti alkalne fosfataze u krvi pacijenata sa žuticom ukazuje na njegovu mehaničku prirodu.
Ispitivanje funkcije jetre
Porazom jetre ne narušavaju se sve njegove funkcije, ne istodobno, a ne jednako. Osim toga, jetra ima značajan pričuvni kapacitet: dovoljno da spasi 20% funkcionalnog parenhima jetre kako bi se održala tjelesna aktivnost. Regenerativna sposobnost jetre je jednako velika. Stoga, određeno smanjenje funkcionalne sposobnosti jetre ne može utjecati na stanje pacijenta, jer jetra osigurava potrebnu razinu vitalnih procesa u tim uvjetima.
Suština većine funkcionalnih testova (ne samo jetre, nego i drugih organa) je da je testni organ tako zahtjevan da se bolesni organ ne može nositi s njima (metoda opterećenja). Među uzorcima kojima se ispituju funkcije jetre, neki odražavaju specifičnu aktivnost ovog organa, na primjer funkcije pigmenta, neutraliziranja, stvaranja proteina; drugi uzorci samo djelomično otkrivaju funkciju jetre, budući da njeno sudjelovanje u ovoj vrsti metabolizma nije izolirano, već je povezano s ulogom drugih organa. To uključuje, na primjer, uzorke koji ispituju metabolizam ugljikohidrata, vode, masti.
Sl. 117. Shema izolacije bilirubina u normi (/) i raznim vrstama žutice: hemolitički (2), parenhimski (J) i mehanički <4).
Proučavanje metabolizma pigmenata Odraz pigmentnog metabolizma u jetri je sadržaj bilirubina u krvi (kao i izmetu i urinu) i produkata njegovog oporavka. Identifikacija poremećaja metabolizma pigmenta daje ideju o funkcionalnom stanju hepatocita, a također pomaže u razlikovanju različitih vrsta žutice.
Formiranje bilirubina javlja se u retikuloendotelnim stanicama koštane srži, limfnim čvorovima, ali uglavnom u slezeni, kao iu zvjezdastim retikuloendotelnim stanicama jetre (Sl. 117). Bilirubin nastaje iz hemoglobina koji se oslobađa tijekom fiziološkog razgradnje crvenih krvnih stanica; u isto vrijeme, hemoglobin se razlaže u proteinsko tijelo globina i željeza koji sadrži heme. U stanicama retikuloendotelnog sustava, slobodni bilirubin nastaje iz oslobođenog hema, koji cirkulira u krvi u nestabilnoj vezi s albumin proteinom. Sadržaj slobodnog bilirubina u krvi je 8.55-20.52 μmol / l (0.5-1.2 mg%). Veći dio ulazi u jetru, gdje se oslobađa iz povezanosti s albuminom i, uz sudjelovanje jetrenih enzima, kombinira se s glukuronskom kiselinom i tvori spoj koji je topiv u vodi, bili-rubinglukuronid (mono- i diglukuronid, ili vezani bilirubin), koji se izlučuje u bilijarni trakt.
Posljedično, jetra je uključena u razmjenu bilirubina, obavljajući sljedeće funkcije: 1) stvaranje bilirubina u zvjezdastim retikuloendotelnim stanicama; 2) hvatanje slobodnog bilirubina iz krvi; 3) stvaranje spoja bilirubina s glukuronskom kiselinom; 4) bilirubiranje izlučivanja glukuronida u žuč (vezani bilirubin).
Početkom XX. Stoljeća. Van den Berg je uočio različitu interakciju seruma bolesnika sa žuticom sa sulfodiazoreaktivom s žuticom različitih etiologija. Dok je serum pacijenta s opstruktivnom žuticom odmah postao crven nakon dodavanja diazoreaktivnog sredstva, ta promjena u boji seruma pacijenta s hemolitičkom žuticom dogodila se tek nakon dodavanja alkohola. Reakcija u prvom slučaju nazvana je izravna, u drugom - neizravna. Pokazalo se da se indirektna reakcija daje slobodnim bilirubinom i izravnom reakcijom bilirubiranjem glukuronida (konjugiranog, tj. Vezanog bilirubina). Ovisno o dodavanju jedne ili dvije molekule glukuronske kiseline u molekulu bilirubina, formira se mono- ili diglukuronid bilirubin.
U krvi zdravih ljudi je samo slobodan pigment. Kod bolesti koje su popraćene narušavanjem ili narušavanjem normalnog iscjedka bilirubina, on ulazi u krvotok, a zatim oba pigmenta cirkuliraju u njemu (mogu se odrediti zasebno).
Kvalitativni uzorak Van den Berg daje indikativne informacije: ako se ispostavi da je neizravan, možemo pretpostaviti da u krvi postoji samo slobodni bilirubin; ako se ispostavi da je izravan, tada nije poznato u kojem omjeru su oba pigmenta - pozitivna izravna reakcija maskira prisutnost bilo koje količine slobodnog bilirubina. Trenutno uglavnom koriste odvojeno kvantitativno određivanje frakcija bilirubina. U većini istraživanja provedenih u tu svrhu koriste se isti diazo reagensi kao i za kvalitativni uzorak (diazo reagens I: 5 g sulfanilne kiseline i 15 ml jake klorovodične kiseline se otopi u destiliranoj vodi, a volumen se podesi na 1 l destiliranom vodom; diazoreakt II: 0,5% otopina natrijevog nitrita, diazo mješavina: 10 ml diazoreaktivnog I + 0,25 ml diazoreaktivnog II).
Kvalitativni test: u 0,5 ml seruma uliveno je 0,25 ml diazo mješavine. U slučaju crvenila u serumu unutar manje od 1 min, reakcija se smatra izravnom i ukazuje na prisutnost serum vezanog bilirubina. Ako se crvenilo pojavi polagano (unutar 1-10 min), što se događa kada se relativno mala količina vezanog bilirubina veže na slobodno, smatra se da je reakcija izravno odgođena. Ako nema crvenila duže od 10 minuta, izravna reakcija se smatra negativnom. Ako želite biti sigurni da žuta boja takvog seruma ovisi o bilirubinu, dodajte dvostruku količinu alkohola, filtrirajte i dodajte diazo-smjesu u filtrat, zbog čega tekućina postaje ružičasta (neizravna reakcija). Postoje mnoge metode za kvantitativno određivanje frakcija bilirubina. Neke od njih temelje se na činjenici da na slobodni bilirubin utječu tvari kao što je kofein, koji se koristi u najčešćim metodama Endrashika, metil alkohola, itd., Djelujući kao katalizator, akcelerator, dobiva sposobnost reagiranja s diazoreaktantom. U prvom dijelu seruma tretiranog s akceleratorom moguće je odrediti ukupni sadržaj obje frakcije. U drugom dijelu, bez dodavanja akceleratora, određuje se samo vezani pigment. Oduzimajući njegovu vezanu frakciju od ukupne količine bilirubina, oni će prepoznati slobodnu frakciju. Ostale metode za odvojeno određivanje frakcija bilirubina (kemijske, kromatografske) su složenije.
Slobodni bilirubin, netopljiv u vodi, ne izlučuje se bubrezima; nakon vezanja s glukuronskom kiselinom postaje topiva u vodi kada se nakupi u krvi - s subhepatičnom i jetrenom žuticom, otkriva se u urinu. U bilijarnom traktu oslobađa se samo vezani bilirubin (bilirubinglukuronid). U velikim žučnim kanalima i žučnom mjehuru (osobito tijekom upalnih procesa u njima) i dalje u crijevima, mali dio bilirubina vraća se u urobilinogen, koji se resorbira u gornjem tankom crijevu i ulazi u jetru s krvlju portalne vene. Zdrava jetra potpuno ga hvata i oksidira, ali oboljeli organ ne može izvršiti ovu funkciju, urobilinogen prelazi u krv i izlučuje se urinom kao urobilin. Urobilinurija je vrlo suptilan i rani znak funkcionalnog zatajenja jetre. Ostatak, većina bilirubina u crijevu se vraća do stercobilinogena. Glavni dio se izlučuje u izmet, pretvara u rektum i iz njega (u svjetlu i zraku) u stercobilin, dajući izmet svoju normalnu boju. Mali dio sterkobilinogena, apsorbiran u donjim dijelovima debelog crijeva, kroz hemoroidne vene, zaobilazeći jetru, ulazi u opću cirkulaciju i izlučuje se bubrezima. Normalni urin uvijek sadrži tragove stercobilinogena, koji se pod djelovanjem svjetla i zraka pretvara u sterkobilin.
Većina reakcija koje otkrivaju proizvode za smanjenje bilirubina u urinu daju slične rezultate s urobilinom i stercobilinom, iako se te dvije tvari razlikuju i po kemijskoj strukturi i po fizičkim svojstvima. Metode za njihovo razdvajanje su relativno složene. Stoga se u laboratorijskoj praksi otvaraju zajedno i označavaju kao urobilinoidi (tijela urobilina).
Sadržaj tijela urobilina u mokraći povećava se ne samo kada je funkcija jetre nedovoljna, nego i kada se povećava hemoliza. U tim slučajevima, zbog oslobađanja značajne količine hemoglobina, stvara se više bilirubina i izlučuje u crijevo. Povećana proizvodnja sterko-bilina dovodi do povećanog izlučivanja urina. U slučaju opstruktivne žutice, kada žuč uopće ne ulazi u crijevo, u fecesu ne postoji sterkobilin, u urinu nema tijela urobilina. Kada hepatocelularna žutica smanjuje izlučivanje bilirubina u žuč, količina stercobilina u izmetu se smanjuje, a broj urobilinskih tijela u urinu se povećava. Njihov omjer, koji iznosi 10: 1–20: 1, značajno se smanjuje, dostižući 1: 1 kod teških oštećenja jetre, a kod hemolitičkih žutica povećanje stercobilina značajno premašuje povećanje izlučivanja urobilinskih tijela u mokraći. Njihov se omjer povećava na 300: 1–500: 1. Omjer proizvoda za oporavak bilirubina u fecesu i urinu mnogo je značajniji u razlikovanju žutica od apsolutne vrijednosti svake od njih.
Proučavanje metabolizma ugljikohidrata. U stanicama jetre uz sudjelovanje enzimskih sustava dolazi do sinteze glikogena, njegovog taloženja i glikogenolize, kao i glikoneogeneze. Održavanje glukoze u krvi osigurava se, osim jetre, djelovanjem drugih organa i sustava - gušterače, hipofizno-nadbubrežne žlijezde, itd. S tim u vezi, glukoza u krvi posta mijenja se samo s vrlo teškim oštećenjem jetre i otkriva njezino nedovoljno sudjelovanje u ugljikohidratima razmjena je moguća samo uz pomoć funkcionalnih uzoraka.
Test opterećenja glukozom je neučinkovit, budući da na sadržaj posljednjeg u krvi, uz već spomenute organe, utječe i stanje vegetativnog živčanog sustava, zalihe glikogena u jetri i mišićima itd.
Test s opterećenjem galaktozom je poznate vrijednosti (galaktoza se ne apsorbira u tkiva i organe, osim u jetri, a hormoni ne utječu na njegov sadržaj u krvi). Pacijentu je dopušteno piti otopinu od 40 g galaktoze u 200 ml vode i odrediti njezino izlučivanje u urinu. Normalno se javlja ne više od 4 sata i ne prelazi 3 g. Bubrežna funkcija i crijevna apsorpcija mogu utjecati na izlučivanje galaktoze u urinu, tako da je određivanje sadržaja galaktoze u krvi značajnije. Uz dobru funkciju jetre, maksimalni porast sadržaja galaktoze u krvi bilježi se nakon 30-60 minuta i ne prelazi 15% početne razine; potonji se ponovno dostigne za 2 sata, a slaba funkcija jetre povećava razinu galaktoze, a smanjenje razine galaktoze u krvi dolazi sporije.
Proučavanje metabolizma proteina Uloga jetre u metabolizmu proteina vrlo je visoka: proteini se sintetiziraju i talože u njemu, aminokiseline, polipeptidi hrane i proizvodi razgradnje proteina tkiva ulaze u krvotok.
Ovdje se kataboliziraju, neutraliziraju i uklanjaju neiskorišteni proizvodi razgradnje. Neke aminokiseline prolaze deaminaciju i transaminaciju. Oslobođeni amonijak se jetrom pretvara u manje toksičnu ureu, a od aminokiselina donesenih izvana i sintetiziranih jetrom, ona ponovno gradi vlastite tkivne proteine, kao i krvne proteine; albumin, globulini (a, p do neke mjere, y), fibrinogen, protrombin, heparin, neki enzimi. U jetri nastaju spojevi proteina s lipidima (lipoproteini) i ugljikohidrati (glikoproteini).
Kršenje funkcije stvaranja proteina jetre se otkriva ispitivanjem proteina krvne plazme ili seruma. Ovo kršenje utječe ne toliko na ukupnu količinu bjelančevina, koliko omjer njihovih frakcija, čija je promjena - disproteinemija - uočena kod većine oštećenja jetre.
Metoda elektroforeze na papiru, koja se danas najčešće koristi u kliničkoj praksi, temelji se na činjenici da različiti proteini u električnom polju ovise o veličini, obliku molekule, naboju i drugim faktorima pri različitim brzinama prema pozitivnoj elektrodi. Tijekom elektroforeze na papiru, različite frakcije proteina koncentrirane su u različitim dijelovima papirne trake, gdje se mogu identificirati odgovarajućim bojanjem. Veličina frakcija određena je intenzitetom boje svake od njih. Proteini u plazmi podijeljeni su u pet glavnih frakcija - albumin; a, - i2-, (5-, kao i y-globulini (tablica 4.) Elektroforeza u drugim medijima (agar, gel škroba, itd.) Omogućuje dijeljenje proteina na veći broj frakcija.
Kod bolesti jetre je smanjenje u omjeru albumin-globulin (A / G) najčešći, uglavnom zbog smanjenja
Tablica 4. Normalni proteinogram
Zdravlje, medicina, zdrav način života
Kvantitativni test funkcije jetre
Kronične bolesti jetre karakterizira prisutnost dugog latentnog razdoblja s minimalnim nespecifičnim kliničkim simptomima (stupanj kompenzacije). U terminalnom stadiju bolesti razvijaju se ascites, žutica, encefalopatija i prekoma (faza dekompenzacije). Razina albumina i protrombina u serumu omogućuje procjenu sintetske funkcije jetre, koja u većini slučajeva dugo ostaje normalna. Kvantitativno istraživanje funkcije jetre u ranim fazama dinamike omogućuje praćenje učinkovitosti liječenja i procjene prognoze, ali nema dijagnostičku vrijednost.
Ispitajte galaktozu
Galaktoza je bezopasna tvar. Može se davati intravenozno u dozi dovoljnoj za zasićenje enzimskog sustava odgovornog za njegovu eliminaciju. Brzina eliminacije galaktoze ovisi o njenoj fosforilaciji galaktokinazom. U ovom slučaju, potrebno je uzeti u obzir dio primijenjene doze, koji se eliminira ekstrahepatičnim putem. Ovaj test prilično točno odražava funkciju jetrenih stanica, ali zahtijeva ponovljeno određivanje razine galaktoze tijekom 2 sata.
Tablitsa2-2. Kvantitativni test funkcije jetre
Mikrosomi (sustav citokroma P450)
Glikoprotein s terminalnim ostatkom galaktoze
* Uz nisku dozu, možete procijeniti protok krvi u jetri.
Testovi disanja
Aminopirin se N-demetilacijom transformira pomoću citokroma P450 (koji se nalazi u mikrosomalnoj frakciji hepatocita) u ugljični dioksid. Ova tvar u svojim svojstvima zadovoljava zahtjeve za respiratorne testove u ispitivanju funkcije jetre. Aminopirin je označen radioaktivnim izotopom od 14 C i dan je oralno. Uzorci izdahnutog zraka prikupljaju se u intervalima od dva sata. Koncentracija 14 ° C u izdisanom CO2 u korelaciji s brzinom smanjenja radioaktivnosti u plazmi. Uzorak odražava preostalu masu funkcionalnih mikrosoma i živog jetrenog tkiva. Rezultati dobiveni u pokusima na štakorima s modelom ciroze jetre ukazuju na to da dolazi do smanjenja N-demetilacije zbog gubitka funkcionalne mase hepatocita; u isto vrijeme, funkcionalna aktivnost po hepatocitu ostaje nepromijenjena. Studija ima prognostičku vrijednost i omogućuje praćenje učinkovitosti liječenja (njegova uloga u dijagnozi je mala). Test aminopirina može se koristiti za proučavanje učinka lijekova na funkciju jetrenih mikrosomalnih enzima.
Označeni 14 S kofeinom i fenacetinom također se može koristiti pri provođenju respiratornih testova. Uzorak s opterećenjem od 14 C-galaktoze omogućuje procjenu enzima koji su lokalizirani u citosolu. Svi respiratorni testovi su složeni i skupi, pa je malo vjerojatno da će se oni u budućnosti široko koristiti.
Uklanjanje kofeina pomoću žlijezda slinovnica
Kofein (1,3,7-trimetilksantin) se gotovo potpuno metabolizira pomoću N-demetilacije u mikrosomalnom sustavu jetre (citokrom P448). Metilksantini se izlučuju u urinu. Razina kofeina u serumu i žlijezda slinovnica može se istražiti imunoanalizom enzima. Brzina izlučivanja kofeina sa sline preko noći dobro korelira s njegovim klirensom, kao i rezultatima respiratornog testa s aminopirijom. Proučavanje izlučivanja kofeina pomoću žlijezda slinovnica je jednostavan način za procjenu poremećaja funkcije jetre. Različiti čimbenici mogu utjecati na klirens kofeina: pušenje ubrzava metabolizam kofeina induciranjem enzima, neki lijekovi, poput cimetidina, inhibiraju razgradnju kofeina; odstupanje kofeina smanjuje se s dobi. Kod ponovljenog određivanja klirensa kofeina kod istog pacijenta, doza kofeina bi trebala biti ista, budući da njegovo čišćenje ovisi o dozi.
Testirajte s lidokainom
Lidokain se metabolizira oksidativnom N-deetilacijom pomoću citokroma P450; u isto vrijeme, formira se monoetilglicen-cenksilidid (MEGE), čija razina korelira s brzinom klirensa lidokaina. Određivanje koncentracije MEGE u serumu nakon intravenske primjene lidokaina omogućuje kvantificiranje funkcije jetre. Koncentracija MEGE podložna je značajnim fluktuacijama kod ljudi sa zdravom jetrom i kod bolesnika s blagim narušavanjem njegove funkcije. Kod ciroze jetre uočava se značajno smanjenje ovog pokazatelja, a stupanj opadanja korelira s prognozom bolesti. U slučaju diferencijalne dijagnoze između ciroze i manjih oštećenja jetre, istraživanje eliminacije galaktoze i aminopirinskog respiratornog testa su više informativni.
Test s antipirinom
Antipirin ima dugi poluživot, koji u bolesnika s teškim oštećenjem jetre može biti duži od 30 sati, pa se uzorci krvi i sline za istraživanje moraju uzeti duže vrijeme, što ograničava uporabu ovog uzorka u dijagnostičke svrhe.
Određivanje asialoglikoproteinskih receptora
Hepatociti zaključuju asialoglikoproteine (s terminalnim ostatkom galaktoze) iz krvožilnog sloja zbog prisutnosti specifičnih receptora na sinusnoj membrani hepatocita. Kada su oštećenja parenhima u jetri, broj ovih receptora se smanjuje. Procjenjuje se prema stupnju hvatanja jetre obilježenog 99m Tc galaktozil neoglikalbumina (analog asialoglikoproteina), koji se određuje pomoću standardne scintilacijske komore nakon jednog pregleda uzorka krvi. Rezultati studije koreliraju s težinom bolesti (utvrđenom prema Dječjem kriterijskom sustavu), rezultatima respiratornog testa s klirensom aminopirina i indocianina. Prosječna koncentracija receptora u terminalnom stadiju ciroze iznosi 0,35 ± 0,07 µmol / L u usporedbi s 0,83 ± 0,06 µmol / L u kontrolnoj skupini [9]. Slični rezultati dobiveni su kada se koristi humani serumski albumin obilježen s 99m Tc-dietilentriamom i npenta-acetatnim galaktozilom [5]. Broj receptora se smanjuje s akutnim hepatitisom i ponovno se povećava tijekom razdoblja oporavka [12]. Unatoč obećavajućim rezultatima, ovo se istraživanje provodi samo u posebnim slučajevima.
Izlučni učinak jetre (test bromsulfaleina)
Stara metoda proučavanja brzine eliminacije intravenozno ubrizganog BS iz krvožilnog sloja omogućuje procjenu sposobnosti apsorpcije i izlučivanja hepatocita. Ova metoda nije primijenjena u klinici zbog svoje složenosti, visoke cijene i mogućih komplikacija [4].